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Expressão da proteína vapa de Rhodococcus equi em linhagens vacinais de Salmonella enterica (2004)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: OLIVEIRA, ALINE FERREIRA DE - FMRP
  • Unidades: FMRP
  • Sigla do Departamento: RBI
  • Subjects: MICROBIOLOGIA; IMUNOLOGIA; BIOLOGIA CELULAR
  • Language: Português
  • Abstract: A grave pneumonia abcedante que afeta eqüinos e homens imunodeprimidos, quando infectados por Rhodococcus equi, constitui-se em relevante problema de saúde pública. Os prejuízos econômicos advindos de infecções eqüinas por essa bactéria são importantes motivadores de estudos concernentes ao controle da doença. A antibioticoterapia nem sempre é eficaz devido ao aparecimento de amostras de R. equi resistentes aos antibióticos convencionais (rifampicina/eritromicina). Assim, impõe-se desenvolver vacinas eficientes, que reduziriam a letalidade de potros de alto valor comercial. No entanto, várias estratégias vacinais ensaiadas usando R. equi avirulento ou bactérias mortas, não induziram resposta imunitária protetora. Sabendo-se que a proteína VapA corresponde a um fator de virulência de R. equi dotada de alta imunogenicidade e que linhagens atenuadas de S. enterica Typhimurium são boas carregadoras de proteínas heterólogas para células do sistema linfóide, propusemo-nos a clonar e expressar o gene vapA em linhagem atenuada de S. enterica Typhimurium e avaliar o uso dessa bactéria transformada como vacina viva potencialmente indutora de proteção contra a rodococose experimental. O gene vapA amplificado por PCR foi clonado no vetor plasmidial pY A3137trc, pertencente ao sistema letal balanceado asd. A expressão foi induzida pelo forte promotor constitutivo trc. Em seguida, os plasmídios pYA3137trcvapA e pYA3137trc foram transferidos para S. enterica Typhimurlum‘ANTIIND. X 3987’ por transdução, utilizando o fago P22HT. Obteve-se assim uma linhagem atenuada de S. enterica Typhimurium ‘ANTIIND. X 3987’ contendo o plasmídio pY A3137trcvapA que expressa a proteína VapA de R. equi, tendo como controle a linhagem de S. enterica Typhimurium ‘ANTIIND. X 3987’ pY A3137trc. A administração por via oral das linhagens bacterianas transformadas a camundongos BALB/c foi seguida de colonização persistente de tecidos linfóides ... desses "animais. O efeito da imunização com S. enterica Typhimurium ‘ANTIIND. X 3987’ pY A3137trcvapA, frente ao desafio com R. equi, foi comparado ao efeito da linhagem controle, que não expressava o fator de virulência. O clearance de R. equi no pulmão, figado e baço, avaliado por unidades formadoras de colônias (UFC/g de órgão), foi significativamente mais eficiente nos animais imunizados com VapA. As taxas de sobrevivência dos camundongos BALB/c imunizados com S. enterica Typhimurium ‘ANTIIND. X 3987’ pY A3137trcvapA foram 80% e 100% superiores a dos controles, quando desafiados com ’10 POT. 8’ e ’10 POT. 7’ UFC de R. equi, respectivamente. Em termos de histopatologia, o número de granulomas foi significativamente menor no fígado de animais imunizados com a linhagem expressando VapA, sem ocorrência de necrose em qualquer dos dias analisados, diferentemente do grupo controle. Constatou-se que o animal imunizado com VapA desenvolveu resposta inflamatória mais branda, ainda que eficientena eliminação bacteriana dos órgãos desses animais. Conclui-se que a linhagem de S. enterica Typhimurium ‘ANTIIND. X 3987’ expressando VapA induziu proteção contra a infecção por R. equi em camundongos
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 16.12.2004

  • How to cite
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    • ABNT

      OLIVEIRA, Aline Ferreira de; BARREIRA, Maria Cristina Roque Antunes. Expressão da proteína vapa de Rhodococcus equi em linhagens vacinais de Salmonella enterica. 2004.Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2004.
    • APA

      Oliveira, A. F. de, & Barreira, M. C. R. A. (2004). Expressão da proteína vapa de Rhodococcus equi em linhagens vacinais de Salmonella enterica. Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.
    • NLM

      Oliveira AF de, Barreira MCRA. Expressão da proteína vapa de Rhodococcus equi em linhagens vacinais de Salmonella enterica. 2004 ;
    • Vancouver

      Oliveira AF de, Barreira MCRA. Expressão da proteína vapa de Rhodococcus equi em linhagens vacinais de Salmonella enterica. 2004 ;

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