Estudo da S-nitrosação de Ras e participação das MAP quinases (ERK, JNK e p38) na apoptose de células THP-1 induzida por óxido nítrico (2004)
- Authors:
- Autor USP: TSUJITA, MARISTELA - FCF
- Unidade: FCF
- Sigla do Departamento: FBC
- Subjects: APOPTOSE (ESTUDO CLÍNICO); BIOQUÍMICA CLÍNICA; BIOLOGIA CELULAR
- Language: Português
- Abstract: Ras é uma proteína G monomérica que converte estímulos extracelulares em sinais bioquímicos intracelulares e controla uma variedade de processos biológicos, tais como, proliferação, diferenciação, adesão e morte celular por apoptose. Além da ativação mediada por fatores de crescimento e hormônios, Ras pode ser ativado pela interação com o óxido nítrico (NO), um radical capaz de mediar processos de sinalização. Essa interação resulta na S-nitrosação do resíduo de cisteína 118 de Ras. Assim, propusemo-nos avaliar a participação da proteína Ras e das MAP quinases: ERK1/2, JNK e p38 no processo de apoptose de células THP-1 induzida pelo doador de NO, S-nitrosoglutationa (SNOG). Para tanto, transfectamos células THP-1 com o plasmídeo que carrega o gene que codifica para a proteína Ras mutada, na qual o resíduo de cisteína 118 foi trocado por um resíduo de serina, o que tornou Ras não responsiva ao NO. A apoptose foi evidenciada através da formação de corpos apoptóticos, exposição de fosfatidilserina e ativação de caspase-3. A modulação da apoptose via reação de S-nitrosação foi demonstrada através da diminuição estatisticamente significativa da exposição fosfatidilserina nas células transfectadas com o plasmídeo p21`Ras POT.C118S` quando comparadas com as células selvagens e parentais. A ativação da proteína Ras ocorreu após 5, 15 e 30 minutos da adição de SNOG nas células parentais; entretanto, nas células transfectadas com o plasmídeo p21`Ras POT.C118S`. nãoobservamos resposta de ativação de Ras. A avaliação das MAP quinases revelou ativação de máxima de ERK após 4 horas e ativação máxima de JNK e p38 após 2 horas de incubação com SNOG. Em relação as MAP quinases nas células transfectadas, as células p21`Ras POT.C118S` apresentaram diminuição apenas da ativação ERK, quando comparadas com as células p21`Ras POT.Wt`. A utilização dos inibidores específicos de MEK, JNK e p38; PD09895, CEP11004 e S822004, ) respectivamente demonstrou que apenas a inibição de ERK diminuiu significativamente a apoptose nas células THP-1. Concluímos que na apoptose de células THP-1 estimulada por NO, o radical livre ativa Ras via S-nitrosação, que por sua vez, recruta ERK, MAP quinase participante desta cascata de sinalização. Finalmente, demonstramos que ERK exerce papel fundamental na condução do sinal de apoptose no modelo que estudamos.
- Imprenta:
- Data da defesa: 15.10.2004
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ABNT
TSUJITA, Maristela. Estudo da S-nitrosação de Ras e participação das MAP quinases (ERK, JNK e p38) na apoptose de células THP-1 induzida por óxido nítrico. 2004. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2004. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-29042016-125624/. Acesso em: 01 maio 2025. -
APA
Tsujita, M. (2004). Estudo da S-nitrosação de Ras e participação das MAP quinases (ERK, JNK e p38) na apoptose de células THP-1 induzida por óxido nítrico (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-29042016-125624/ -
NLM
Tsujita M. Estudo da S-nitrosação de Ras e participação das MAP quinases (ERK, JNK e p38) na apoptose de células THP-1 induzida por óxido nítrico [Internet]. 2004 ;[citado 2025 maio 01 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-29042016-125624/ -
Vancouver
Tsujita M. Estudo da S-nitrosação de Ras e participação das MAP quinases (ERK, JNK e p38) na apoptose de células THP-1 induzida por óxido nítrico [Internet]. 2004 ;[citado 2025 maio 01 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-29042016-125624/
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