Caracterização dos produtos secretados por bactérias de interesse biotecnológico nos meios de cultura (Clostridium tetani, Clostridium botulinum, Corynebacterium diphtheriae e Bordetella pertussis) (2004)
- Authors:
- Autor USP: PERPETUO, ELEN AQUINO - Interunidades em Biotecnologia
- Unidade: Interunidades em Biotecnologia
- Subjects: BIOTECNOLOGIA; ENZIMAS PROTEOLÍTICAS; TOXINAS (DESENVOLVIMENTO)
- Language: Português
- Abstract: No presente projeto caracterizamos os meios meio de cultura das bactérias Clostridum tetani, Clostridium botulinum, Bordetella pertussis e Corynebacterium diphtheriae. No sobrenadante dos meios de cultura de B. pertussis, através da análise eletroforética, foi possível identificar uma proteína de 69 kDa que poderia ser utilizada como marcador do processo de produção. Já no meio de cultura de C. diphtheriae foram identificadas várias atividades proteolíticas ao longo do processo de fermentação, sendo os melhores substratos capazes de identificar tal atividade, aqueles derivados de bradicinina (Bk-Gln).Também através de ensaios cinéticos verificamos que as atividades proteolíticas encontradas no meio de cultura de B. pertussis foram inibidas significativamente por PMSF e EDTA, sugerindo a presença de serino e metaloproteases neste meio.) Com as toxinas tetânica e botulínica, os ensaios foram desenvolvidos no sentido de caracterizar a especificidade da metaloprotease (cadeia leve da toxina) em relação aos substratos hidrolisados por ela. Pudemos estabelecer constantes cinéticas para os diferentes substratos testados e definir a especificidade destas enzimas em relação a substratos modificados. Asseguramos que a hidrólise dos substratos era devido à presença das metaloproteases de C. tetani e botulinum, através de ensaios de inibição com anticorpos específicos produzidos em coelhos e camundongos Balb C e também através de inibidores químicos (EDTA). Destaforma foi possível identificar novos marcadores que poderão ser úteis no acompanhamento do processo produtivo e, particularmente no desenvolvimento da vacina pertussis acelular. No caso de C. tetani e botulinum foi possível através da utilização de substratos efetuar a caracterização cinética, além de diferenciar os diferentes sorotipos da toxina botulínica
- Imprenta:
- Data da defesa: 15.10.2004
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ABNT
PERPETUO, Elen Aquino. Caracterização dos produtos secretados por bactérias de interesse biotecnológico nos meios de cultura (Clostridium tetani, Clostridium botulinum, Corynebacterium diphtheriae e Bordetella pertussis). 2004. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2004. . Acesso em: 28 dez. 2025. -
APA
Perpetuo, E. A. (2004). Caracterização dos produtos secretados por bactérias de interesse biotecnológico nos meios de cultura (Clostridium tetani, Clostridium botulinum, Corynebacterium diphtheriae e Bordetella pertussis) (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. -
NLM
Perpetuo EA. Caracterização dos produtos secretados por bactérias de interesse biotecnológico nos meios de cultura (Clostridium tetani, Clostridium botulinum, Corynebacterium diphtheriae e Bordetella pertussis). 2004 ;[citado 2025 dez. 28 ] -
Vancouver
Perpetuo EA. Caracterização dos produtos secretados por bactérias de interesse biotecnológico nos meios de cultura (Clostridium tetani, Clostridium botulinum, Corynebacterium diphtheriae e Bordetella pertussis). 2004 ;[citado 2025 dez. 28 ] - Desenvovilmento de um método para quantificação da toxina tetânica através da utilização de substratos de fluorescência apagada
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