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Estudo da maturação nuclear in vitro de oócitos de cães em meios suplementados com hormônios e co-cultivo em células homólogas da tuba uterina (2003)

  • Authors:
  • Autor USP: VANNUCCHI, CAMILA INFANTOSI - FMVZ
  • Unidade: FMVZ
  • Sigla do Departamento: VRA
  • Subjects: ESTRÓGENOS; HORMÔNIOS PROGESTACIONAIS; CÃES
  • Language: Português
  • Abstract: As novas biotécnicas são ferramentas inovadoras no estudo da fisiologia da reprodução de cães, bem como na preservação do material genético de espécies ameaçadas de extinção. Tendo em vista, pois, a relevância de tais ferramentas, emprestou-se a este estudo o objetivo maior de avaliar os efeitos do 17-'beta' estradiol, progesterona e do co-cultivo em células da tuba uterina na maturação in vitro de oócitos em cães. Ovários de cadelas em anestro foram fatiados em PBS com 10% SFB. Os oócitos foram selecionados e divididos em 8 grupos: grupo 1 (sem suplementação hormonal), grupo 2 (20 'mü'g/ml de 17-'beta' estradiol), grupo 3 (20 'mü'g/ml de progestrona), grupo 4 (20 'mü'g/ml de 17-'beta' estradiol e 20 'mü'g/ml de progesterona), grupo 5 (co-cultivo em células da tuba uterina sem suplementação hormonal), grupo 6 (co-cultivo em células da tuba uterina + 20 'mü'g/ml de 17-'beta' estradiol), grupo 7 (co-cultivo em células da tuba uterina + 20 'mü'g/ml de progesterona) e grupo 8 (co-cultivo em células da tuba uterina + 20 'mü'g/ml de 17-'beta' estradiol + 20 'mü'g/ml de progesterona). O cultivo das células da tuba uterina foi realizado por no mínimo 48 horas previamente à adição dos oócitos. Para a maturação, utilizou-se TCM 199 suplementado com 2,5 'mü'g/ml de FSH e 5 'mü'g/ml de LH. Decorridas 48, 72 e 96 horas em estufa a 39 'GRAUS'C, 5% de C'O IND. 2' em ar e alta umidade, os oócitos foram fixados em paraformaldeído a 4% com Triton 10X e corados com Hoescht 33342 (10'mü'g/ml) em glicerol. O estágio de maturação nuclear (vesícula germinativa - VG, quebra da vesícula germinativa - QVG, metáfase I - MI, metáfase II - MII, degenerados ou não passíveis de determinação) foi avaliado em microscópio invertido equipado com luz ultravioleta e filtro de 365-420 de excitação/emissão. Os dados foram analisados mediante o PROC NPAR1WAY de análise de variância não paramétrica, sendo o efeito dos tratamentos (continua) ) verificado por meio do teste de Kruskal-Wallis, e as comparações múltiplas do teste de Wilcoxon com os tratamentos comparados dois a dois, considerando as diferenças significativas quando p<0,05. Verificou-se influência positiva da suplementação hormonal no desenvolvimento oocitário in vitro, particularmente com referência à adição de progesterona, associada ou não ao estrógeno. Não houve influência significativa do co-cultivo de células da tuba uterina na maturação oocitária em comparação aos meios de cultivo, sem presença de células epiteliais da tuba uterina, suplementados com hormônios esteróides. Conquanto sem significância estatística, verificou-se tendência de os oócitos, obtidos de cadelas em anestro, desenvolverem-se ao estágio de metáfase II após o período de maturação de 96 horas. Demostrou-se, portanto, ser plenamente exeqüível o estudo da maturação de oócitos de cães em sistemas de cultivo in vitro a partir de ovários obtidos por ovário-histerectomia, tal estudo propicia, ademais, a pesquisa de característicasreprodutivas fisiológicas da espécie
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 01.12.2003
  • Acesso à fonte
    How to cite
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    • ABNT

      VANNUCCHI, Camila Infantosi; OLIVEIRA, Clair Motos de. Estudo da maturação nuclear in vitro de oócitos de cães em meios suplementados com hormônios e co-cultivo em células homólogas da tuba uterina. 2003.Universidade de São Paulo, São Paulo, 2003. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-22072004-164522/ >.
    • APA

      Vannucchi, C. I., & Oliveira, C. M. de. (2003). Estudo da maturação nuclear in vitro de oócitos de cães em meios suplementados com hormônios e co-cultivo em células homólogas da tuba uterina. Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-22072004-164522/
    • NLM

      Vannucchi CI, Oliveira CM de. Estudo da maturação nuclear in vitro de oócitos de cães em meios suplementados com hormônios e co-cultivo em células homólogas da tuba uterina [Internet]. 2003 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-22072004-164522/
    • Vancouver

      Vannucchi CI, Oliveira CM de. Estudo da maturação nuclear in vitro de oócitos de cães em meios suplementados com hormônios e co-cultivo em células homólogas da tuba uterina [Internet]. 2003 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-22072004-164522/


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