Expressão dos genes CDR1,2, MDR1 E ERG11 por cepas de Candida Albicans com fenótipo de resistência ao fluconazol (2003)
- Authors:
- Autor USP: PAULA, CLAUDETE RODRIGUES - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: MICROBIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Introdução: O indiscriminado uso profilático ou terapêutico de drogas azóis fungistáticas, como o fluconazol, tem aumentado o número de cepas de Candida spp. resistentes in vitro a estas drogas, correlacionando frequentemente a uma falência terapêutica. Diferentes mecanismos moleculares podem contribuir com a resistência de Candida spp. às drogas azóis, como a mutação por ponto no gene ERG11, a aumentada expressão deste gene, bem como a dos genes CDR1,2 e MDR1. Objetivos: A expressão destes genes foi monitorada e comparada entre cepas de Candida albicans sensíveis, resistentes ao fluconazol ou com sensibilidade dependente da dose (respectivamente, CIM < 8, CIM > 64 e 16 < CIM < 32 mg mL-1). Metodologia: RNA total foi extraído, desnaturado, separado por eletroforese e transferido para membrana de nitrocelulose. As sondas para hibridização por Northern blot foram obtidas através da amplificação por PCR dos fragmentos dos genes estudados, à partir do DNA genômico de Candida albicans. Após PCR, os fragmentos foram ainda amplificados por transformação de Escherichia coli DH52 usando TOPO TA como vetor. Clones Ampicilina-resistentes foram selecionados e fragmentos dos genes foram recuperados do vetor por digestão com enzima de restrição EcoR1 e sequenciados. Estes fragmentos foram marcados pela introdução de [g 32 P]d CTP e, após hibridização overnight, blots foram lavados e expostos a filme autoradiográfico. Blots foram tambem hibridizados com ACT1, genecodificador da actina, que serviu como controle interno das quantidades de RNA extraidos. Resultados: O gene CDR1 foi claramente expresso pelas cepas de C. albicans resistentes mas seu RNA não foi detectado nas cepas sensíveis ao fluconazol. RNA correspondente aos demais genes não foi detectado em cepas sensíveis nem resistentes. Conclusão: Cepas resistentes ao fluconazol apresentaram um único e específico mecanismo de resistência a esta droga, representado pelo aumento de proteínas de membrana Cdr1, produto
- Imprenta:
- Publisher: Sociedade Brasileira de Microbiologia
- Date published: 2003
- Conference titles: Congresso Brasileiro de microbiologia
-
ABNT
RIBEIRO, M. A.; PAULA, Claudete Rodrigues; PERFECT, J.; COX, G. M. Expressão dos genes CDR1,2, MDR1 E ERG11 por cepas de Candida Albicans com fenótipo de resistência ao fluconazol. Anais.. [S.l.]: Sociedade Brasileira de Microbiologia, 2003. -
APA
Ribeiro, M. A., Paula, C. R., Perfect, J., & Cox, G. M. (2003). Expressão dos genes CDR1,2, MDR1 E ERG11 por cepas de Candida Albicans com fenótipo de resistência ao fluconazol. In . Sociedade Brasileira de Microbiologia. -
NLM
Ribeiro MA, Paula CR, Perfect J, Cox GM. Expressão dos genes CDR1,2, MDR1 E ERG11 por cepas de Candida Albicans com fenótipo de resistência ao fluconazol. 2003 ; -
Vancouver
Ribeiro MA, Paula CR, Perfect J, Cox GM. Expressão dos genes CDR1,2, MDR1 E ERG11 por cepas de Candida Albicans com fenótipo de resistência ao fluconazol. 2003 ; - Infecção hospitalar fúngica: experiência em hospitais públicos de São Paulo
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