Determinação dos parâmetros cinéticos de resistência térmica da proteína verde fluorescente recombinante (GFPuv) (2003)
- Authors:
- Autor USP: ISHII, MARINA - FCF
- Unidade: FCF
- Sigla do Departamento: FBT
- Subjects: BIOTECNOLOGIA; MICROBIOLOGIA APLICADA; ESTERILIZAÇÃO DE ALIMENTOS
- Language: Português
- Abstract: Células transformadas de E.colí DH5-´ALFA´ expressando a proteína verde fluorescente (GFPuv, pico de excitação e emissão de 394nm e 509nm) foram submetidas a extração pelo método de partição de três fases (TPP) e o extrato obtido purificado por cromatografia de interação hidrofóbica (HIC). O objetivo principal deste trabalho foi estudar a termoestabilidade da GFPuv extraída, para avaliar a sua possível utilização como indicador biológico econômico, de resposta rápida e precisa para processos térmicos de esterilização utilizando o calor úmido. A estabilidade térmica da proteína foi estudada em diferentes soluções-tampão (acetato, fosfato e tris-HCl 10mM) no intervalo de valor de pH de 5,0 a 9,0 e, em temperaturas entre ´75 GRAUS CENTIGRADOS' e ´95 GRAUS CENTIGRADOS'. Os parâmetros de resistência térmica determinados foram: o tempo de redução decimal (Valor D - min), valor z (´GRAUS CENTIGRADOS'), coeficiente ´Q IND.10´ e valor de energia de ativação (kcal/mol). A termoestabilidade da GFPuv, expressa em valor D, mostrou correlação linear para valores de pH > 5,50, em tampão acetato. Em tampão fosfato, para valores de pH > 7,50 a estabilidade térmica da proteína foi independente do valor de pH da solução. Em tampão tris-HCl, o valor D mostrou-se inconstante ao aumento do valor de pH da solução. No intervalo de temperatura estudada, em tampão acetato a GFPuv apresentou melhor termoestabilidade (Ea de 19,27 kcal/mol) do que em tampão fosfato (Ea de 26,18kcal/mol ao valor de pH 6,5) e em tampão tris- HCl (Ea 28, 1 9 kcal/mol ao valor de pH 7,0). Em tampão acetato e tris-HCl ao valor de pH 7,0, a termoestabilidade da proteína mostrou-se equivalente. Entretanto, em tampão fosfato aos valores de pH 7,5 e 8,0 e em tampão tris-HCl aos valores de pH 8,0 e 8,5 a GFPuv apresentou menor estabilidade térmica. A GFPuv apresenta potencialidade para ser utilizada como indicador biológico em processos térmicos continua continuaçaoque utilizam calor úmido às temperaturas inferiores a ´100 GRAUS CENTIGRADOS´
- Imprenta:
- Data da defesa: 29.04.2003
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ABNT
ISHII, Marina. Determinação dos parâmetros cinéticos de resistência térmica da proteína verde fluorescente recombinante (GFPuv). 2003. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2003. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9135/tde-25062012-114829/. Acesso em: 10 jan. 2026. -
APA
Ishii, M. (2003). Determinação dos parâmetros cinéticos de resistência térmica da proteína verde fluorescente recombinante (GFPuv) (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9135/tde-25062012-114829/ -
NLM
Ishii M. Determinação dos parâmetros cinéticos de resistência térmica da proteína verde fluorescente recombinante (GFPuv) [Internet]. 2003 ;[citado 2026 jan. 10 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9135/tde-25062012-114829/ -
Vancouver
Ishii M. Determinação dos parâmetros cinéticos de resistência térmica da proteína verde fluorescente recombinante (GFPuv) [Internet]. 2003 ;[citado 2026 jan. 10 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9135/tde-25062012-114829/ - Evaluation of Bacillus atrophaeus ATCC 9372 spores growth using residual media of photosynthetic microorganism culture
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