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Detecção e identificação de Metarhizium anisopliae em larvas de Diatraea saccharalis por Primers específicos (2003)

  • Authors:
  • Autor USP: DESTEFANO, RICARDO HENRI RODRIGUES - ESALQ
  • Unidade: ESALQ
  • Sigla do Departamento: Microbiologia Agricola
  • Subjects: BROCAS (INSETOS NOCIVOS); CONTROLE BIOLÓGICO; FUNGOS ENTOMOPATOGÊNICOS
  • Language: Português
  • Abstract: A região espaçadora ITS rDNA tem sido utilizada como uma importante ferramenta molecular para a identificação de fungos. Neste estudo a região ITS1 - 5.8S - ITS2 foi analisada em diferentes espécies do fungo entomopatogênico Metarhizium incluindo M. anisopliae, M. album e M. flavoviride com o objetivo de se construir primers específicos para a detecção e identificação do fungo no interior de larvas infectadas de Diatraea saccharalis. A amplificação desta região produziu um fragmento único de aproximadamente 540 pb para as linhagens E9, B/Vi e C, e de 600 pb para a linhagem 14 de M. anisopliae var. anisopliae; de 650 bp para M. album e 600 pb para M. flavoviride. Os produtos de PCR obtidos foram digeridos com diferentes enzimas de restrição Afa I, Alu I, Dde I, Hae III, Hpa II e Sau 3A I; e os perfis de PCR-RFLP mostraram nítidas diferenças entre as espécies analisadas. O sequenciamento da região ITS1 – 5.8S – ITS2 permitiu o desenho de primers específicos para as linhagens de M.a. var. anisopliae do Brasil e da Austrália. A amplificação não ocorreu em linhagens de M. álbum, M. flavoviride e Beauveria bassiana. Os DNAs extraídos de larvas infectadas pelas linhagens E9, B/Vi e C do Brasil e linhagem 14, da Austrália, foram testados utilizando-se os primers desenvolvidos. Em todos os experimentos o fungo M.a. var. anisopliae foi detectado 48 horas após a inoculação. A técnica molecular empregada neste estudo permite a rápida e segura detecção e identificação de M.a.var. anisopliae em bioensaios de laboratório e de campo, programas de manejo de pragas e estudos de epizootiologia
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 05.06.2003
  • Acesso à fonte
    How to cite
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    • ABNT

      DESTEFANO, Ricardo Henri Rodrigues; MESSIAS, Claudio Luiz. Detecção e identificação de Metarhizium anisopliae em larvas de Diatraea saccharalis por Primers específicos. 2003.Universidade de São Paulo, Piracicaba, 2003. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11138/tde-15072003-141752/ >.
    • APA

      Destefano, R. H. R., & Messias, C. L. (2003). Detecção e identificação de Metarhizium anisopliae em larvas de Diatraea saccharalis por Primers específicos. Universidade de São Paulo, Piracicaba. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11138/tde-15072003-141752/
    • NLM

      Destefano RHR, Messias CL. Detecção e identificação de Metarhizium anisopliae em larvas de Diatraea saccharalis por Primers específicos [Internet]. 2003 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11138/tde-15072003-141752/
    • Vancouver

      Destefano RHR, Messias CL. Detecção e identificação de Metarhizium anisopliae em larvas de Diatraea saccharalis por Primers específicos [Internet]. 2003 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11138/tde-15072003-141752/

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