Construção e caracterização de mini-bibliotecas de EST geradas com RT-PCR de baixa estringencia e Clonagem de uma Apirase de Schistosoma mansoni (2003)
- Authors:
- Autor USP: MARCO, RICARDO DE - IQ
- Unidade: IQ
- Sigla do Departamento: QBQ
- Subjects: SCHISTOSOMA (ESTUDO); DADOS DE SEQUÊNCIA MOLECULAR; CLONAGEM
- Language: Português
- Abstract: Este trabalho demonstrou a construção de minibibliotecas de "Expressed Sequence Tags" (EST) com o uso de RT-PCR de baixa estringencia e "primes" consenso-degenerado. Através do estudo de parâmetros críticos como concentração de sais, temperatura e velocidade de ciclagem, composição dos "primers" e qualidade do RNA mensageiro, foi possível padronizar um protocolo. Tal protocolo permitiu um aumento do numero de seqüências por minibiblioteca em relação a protocolos similares existentes na literatura (Dias neto et al., 1997 e 2000) sem perda de características desejáveis como amplificação preferencial do centro dos genes e normalização das mensagens. As seqüências produzidas levaram a um significativo aumento das seqüências de EST de S. mansoni disponíveis publicamente e permitiu a detecção da existência de novos fragmentos de geles expressos na fase adulta do parasita. Neste trabalho também clonamos uma apirase de S. mansoni cuja a seqüência não havia sido descrita anteriormente. O gene possui cerca de 2,7 mil pares de bases e codifica para uma proteína de 544 anúnoácidos. Esta foi expressa em sistema heterologo e utilizada para obtenção de anticorpos policlonais contra esta proteína. Ut~do estes anticorpos foi possível detectar a proteína no tegumento do parasita
- Imprenta:
- Data da defesa: 24.02.2003
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ABNT
DE MARCO, Ricardo. Construção e caracterização de mini-bibliotecas de EST geradas com RT-PCR de baixa estringencia e Clonagem de uma Apirase de Schistosoma mansoni. 2003. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2003. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-10052018-143753/. Acesso em: 28 dez. 2025. -
APA
De Marco, R. (2003). Construção e caracterização de mini-bibliotecas de EST geradas com RT-PCR de baixa estringencia e Clonagem de uma Apirase de Schistosoma mansoni (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-10052018-143753/ -
NLM
De Marco R. Construção e caracterização de mini-bibliotecas de EST geradas com RT-PCR de baixa estringencia e Clonagem de uma Apirase de Schistosoma mansoni [Internet]. 2003 ;[citado 2025 dez. 28 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-10052018-143753/ -
Vancouver
De Marco R. Construção e caracterização de mini-bibliotecas de EST geradas com RT-PCR de baixa estringencia e Clonagem de uma Apirase de Schistosoma mansoni [Internet]. 2003 ;[citado 2025 dez. 28 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-10052018-143753/ - Estudo da biologia molecular do Schistosoma mansoni
- Caracterização de proteínas codificadas por genes de micro-exon de Schistosoma mansoni
- Lipophosphoglycan 3 from leishmania infantum chagasi binds heparin with micromolar affinity
- The schistosome oesophageal gland: initiator of blood processing
- Transcriptômica e proteômica
- Estudo proteômico de vermes adultos machos e fêmeas de Schistosoma mansoni
- Estudo e caracterização da proteína MEG14
- Estudo da distribuição de elementos transponíveis nos íntrons ortólogos das espécies Chlamydomonas reinhardtii e volvox carteri
- The interaction between human protein S100A9 and the parasite Schistosoma mansoni s protein MEG-14
- Identification of transposable elements in Schistosoma mansoni
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