Freqüência e estabilidade de elementos de inserção em eterococos resistentes à vancomicina isolados no Brasil (2002)
- Authors:
- Autor USP: CAMARGO, ILANA LOPES BARATELLA DA CUNHA - FCFRP
- Unidade: FCFRP
- Sigla do Departamento: 604
- Subjects: ENTEROCOCCUS; MICROBIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: A resistência à vancomicina em enterococos é um problema recente no Brasil, apesar de já ter sido muito estudada nos Estados Unidos e em muitos países da Europa. Sabe-se que a resistência à vancomicina e à teicoplanina, fenótipo VanA, é adquirida por enterococos através da transferência de plasmídeos contendo uma cópia do transposon chamado Tn1546. Este transposon na grande maioria das vezes, não aparece intacto em amostras estudadas em outros países, pois pode sofrer inserção de elementos de inserção ou seqüências de inserção (IS), que são seqüências de DNA móveis, de cerca de 1800pb, encontrados no cromossomo bacteriano que geralmente não codificam nenhuma proteína estrutural, somente proteína para sua própria mobilidade, a enzima transposase. Quando ocorre a evolução genética deste transposon, caracterizada pela deleção e/ou inserção de elementos IS, este passa a ser chamado de "elemento VanA" ou "Tn1546 like elements". A presença de elementos IS nos elementos VanA pode auxiliar no rastreamento de surto inter- ou intra-paciente e/ou hospitais. A presença de seqüências de inserção é de grande importância no estudo da heterogeneidade destes elementos por regiões geográficas. No intuito de verificar a freqüência e a estabilidade destes elementos IS nas amostras isoladas no Brasil, foram estudadas as amostras de enterococos resistentes à vancomicina (do inglês, VRE) do surto detectado em São Paulo, em 1997 a 1998, na Casa de Saúde Santa Marcelina e outros VREisolados em hospitais de várias regiões do Brasil. Foram detectadas e/ou confirmadas as espécies e o genótipo vanA das 48 amostras através da técnica de PCR e todas apresentaram o gene vanA. Foram encontrados 26 E. faecalis, 21 E. faecium e 1 E. gallinarum, o qual foi o primeiro E. gallinarum contendo o gene vanA, altamente resistente à vancomicina, descrito no Brasil. Foi realizada a extração e quantificação de DNA genômico para posterior realização ) de amplificação de elementos VanA por "Long-PCR" com um primer da região invertida e repetida, chamado L-PCR1. Dentre as amostras, a linhagem E. faecium 172/98 apresentou um fragmento maior que 10,8 Kb, as linhagens E. faecalis 28/98 e E. faecium RJ-1 não apresentaram amplificação, todas as outras linhagens apresentaram fragmentos de 10,8 Kb correspondente ao elemento VanA (Tn1546). Foi realizada uma reação de Long-PCR para o grupamento gênico vanRSHAX, chamada L- PCR 2/3, com estas linhagens que apresentaram perfil diferente do protótipo Tn 1546 no L-PCR1. Apenas a linhagem E. faecium RJ-1 apresentou alteração nesta região, amplificando um fragmento maior do que o esperado, indicando uma inserção neste grupamento altamente estável na maioria das linhagens. Todas as amostras foram testadas quanto a presença dos elementos de inserção IS6770, IS1542, IS1216V, IS1476 e IS1251 em seu DNA genômico através da técnica de PCR. Dentre as 48 amostras, todas apresentaram o elemento de inserção IS6770, exceto uma linhagemde E. faecalis e nenhuma das amostras apresentaram o elemento IS 1542. O elemento IS1251 foi detectado em 47,91%, IS1476 em 70,83% e IS1216V em 87,5% das amostras analisadas. Um total de 25 amostras foram submetidas a subcultivos diários, sob pressão seletiva, durante 30 dias, e também a subcultivos mensais sem pressão seletiva, durante 12 meses. Em seguida, cada linhagem estudada foi rigorosamente investigada quanto à ocorrência de eventos genéticos de inserção ou deleção provocados por elementos de inserção. A partir deste experimento podemos concluir que estas linhagens estudadas apresentaram-se totalmente estáveis quanto a inserção de elementos IS do cromossomo para o elemento VanA e/ou deleção de parte do elemento VanA
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2002
- Data da defesa: 12.12.2002
-
ABNT
CAMARGO, Ilana Lopes Baratella da Cunha. Freqüência e estabilidade de elementos de inserção em eterococos resistentes à vancomicina isolados no Brasil. 2002. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2002. . Acesso em: 28 dez. 2025. -
APA
Camargo, I. L. B. da C. (2002). Freqüência e estabilidade de elementos de inserção em eterococos resistentes à vancomicina isolados no Brasil (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Camargo ILB da C. Freqüência e estabilidade de elementos de inserção em eterococos resistentes à vancomicina isolados no Brasil. 2002 ;[citado 2025 dez. 28 ] -
Vancouver
Camargo ILB da C. Freqüência e estabilidade de elementos de inserção em eterococos resistentes à vancomicina isolados no Brasil. 2002 ;[citado 2025 dez. 28 ] - Clô, a bactéria
- Caracterização da Enterococcal leucine-rich protein A (ElrA) de enterococcus faecalis
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