Tese

Identificação e caracterização do promotor basal do gene BhC4-1 (2002)

• Authors:
  • Gitaí, Daniel Leite Góes
  • Larson, Maria Luisa Paçó (Orientador)
• Autor USP: GITAÍ, DANIEL LEITE GÓES - FMRP
• Unidade: FMRP
• Sigla do Departamento: RBP
• Assunto: BIOLOGIA CELULAR
• Language: Português
• Abstract: O gene BhC4-1 de Bradysia hygida (Diptera, Sciaridae) é especificamente expresso na glândula salivar no final do estádio larval, em resposta ao aumento dos títulos de ecdisona que precede a metamorfose. Resultados anteriores mostraram que os fatores envolvidos na regulação da transcrição do gane BhC4-1 estão conservados entre Drosophila melanogaster e B. hygida. Além disso, através da análise de linhagens transgênicas de Drosophila, carregando deleções progressivas da região promotora do gene BhC4-1, foi identificado um fragmento de 97pb (-57/+40) como o possível promotor basal deste gene. No presente trabalho, investigamos essa hipótese analisando a habilidade deste fragmento de dirigir a transcrição de um gene repórter em linhagens transgênicas de Drosophila. A análise de duas linhagens independentes através de ensaios de proteção à RNase mostra que o RNAm da ß-galactosidase é detectado em baixos níveis em todos os estágios do desenvolvimento analisados. Este resultado corrobora a hipótese de que o fragmento de 97pb de BhC4-1 funciona como o promotor basal, uma vez que é suficiente para conferir transcrição basal e constitutiva. Nós também investigamos se o promotor basal identificado neste trabalho poderia dirigir transcrição regulada quando fusionado a um elemento ativador heterólogo. Para esta análise nós geramos Drosophila transgênicas carregando construções onde o fragmento de 97 pb de BhC4-1 foi colocado a jusante do ativado r Fbp-1 e a montante do generepórter lac-z. Análises de nove linhagens transgênicas mostraram que nesses animais a atividade de ß-gal é exclusivamente detectada no corpo gorduroso. Esta atividade é inicialmente detectada em larvas no final do terceiro estádio, continua durante o estádio pré-pupal e não é detectada em adulto. Este padrão de expressão é compatível com o de um gene sob o controle do ativador Fbp-1, mostrando, portanto, que o promotor basal de BhC4-1 é eficientemente ) regulado por este ativador. Os resultados aqui obtidos indicam que o promotor basal de BhC4-1 poderá ser uma ferramenta importante na caracterização de possíveis elementos regulatórios e na construção de novos vetores de expressão gênica
• Imprenta:
  • Publisher place: Ribeirão Preto
  • Date published: 2002
• Data da defesa: 10.06.2002

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How to cite

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• ABNT

  GITAÍ, Daniel Leite Góes. Identificação e caracterização do promotor basal do gene BhC4-1. 2002. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2002. . Acesso em: 23 abr. 2024.

• APA

  Gitaí, D. L. G. (2002). Identificação e caracterização do promotor basal do gene BhC4-1 (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.

• NLM

  Gitaí DLG. Identificação e caracterização do promotor basal do gene BhC4-1. 2002 ;[citado 2024 abr. 23 ]

• Vancouver

  Gitaí DLG. Identificação e caracterização do promotor basal do gene BhC4-1. 2002 ;[citado 2024 abr. 23 ]

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