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Inibidores de proteinase do tipo Bowman-Birk: evolução molecular, expressão na superfície de fagos filamentos e seu papel na interação planta-inseto (2002)

  • Authors:
  • Autor USP: JOSÉ, MÁRCIA OMETTO DE MELLO ALVES - ESALQ
  • Unidade: ESALQ
  • Sigla do Departamento: LGN
  • Subjects: INIBIDORES DE ENZIMAS; BROCAS (INSETOS NOCIVOS); CONTROLE DE PRAGAS; INTERAÇÃO PLANTA-INSETO; RESISTÊNCIA GENÉTICA VEGETAL
  • Language: Português
  • Abstract: Os inibidores de serino proteinases do tipo Bowman-Birk (BBI) possuem dois sítios ativos e são encontrados em plantas das famílias Fabaceae e Poaceae. Neste trabalho foi apresentada a estrutura primária e o padrão de expressão de 14 seqüências expressas (EST, expressed sequence tags) de BBI putativos encontradas no banco de dados do "Projeto Transcriptoma da Cana-de-açúcar" (SUCEST). Estas quatorze seqüências foram utilizadas em conjunto com outras 87 seqüências de BBI previamente descritas e depositadas no banco de dados "GenBank" para a construção de árvores filogenéticas da família BBI. A análise filogenética mostrou que os BBI de monocotiledôneas e dicotiledôneas podem ser claramente separados em diferentes grupos e a topologia das árvores filogenéticas sugere um padrão evolutivo diferente das famílias de BBI em plantas. Os inibidores de dicotiledôneas são bem conservados e acumularam diferenças sutis durante a evolução. Em contrapartida, os inibidores de monocotiledôneas são altamente variáveis, indicando a ocorrência de um processo evolutivo interessante, baseado em eventos de duplicação intragênica e mutação. Dois inibidores de serino proteinases, um de tripsina e outro de quimotripsina, derivados do gene que codifica o inibidor Bowman-Birk de soja, foram expressos na superfície do fago filamentoso M13 e utilizados para a construção de bibliotecas de variantes. Para tal foram feitas mutações em quatro aminoácidos do sítio ativo destesinibidores e duas bibliotecas de expressão na superfície de fagos filamentosos foram construídas. Posteriormente, estas bibliotecas foram utilizadas para a seleção de variantes que melhor interagiam com a tripsina bovina e de Diatraea saccharalis e com as enzimas digestivas presentes no extrato intestinal desta praga. Os variantes selecionados foram seqüenciados, analisados e caracterizados. Os resultados mostraram que a técnica de expressão na superfície de fagos ) filamentosos foi eficiente para selecionar novos inibidores. Além disto, com as mutações realizadas, foi possível transformar a alça de inibição de quimotripsina em uma alça de inibição de tripsina
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 27.11.2002
  • Acesso à fonte
    How to cite
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    • ABNT

      JOSÉ, Marcia Ometto de Mello Alves; SILVA FILHO, Márcio de Castro. Inibidores de proteinase do tipo Bowman-Birk: evolução molecular, expressão na superfície de fagos filamentos e seu papel na interação planta-inseto. 2002.Universidade de São Paulo, Piracicaba, 2002. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11137/tde-14022003-152133/ >.
    • APA

      José, M. O. de M. A., & Silva Filho, M. de C. (2002). Inibidores de proteinase do tipo Bowman-Birk: evolução molecular, expressão na superfície de fagos filamentos e seu papel na interação planta-inseto. Universidade de São Paulo, Piracicaba. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11137/tde-14022003-152133/
    • NLM

      José MO de MA, Silva Filho M de C. Inibidores de proteinase do tipo Bowman-Birk: evolução molecular, expressão na superfície de fagos filamentos e seu papel na interação planta-inseto [Internet]. 2002 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11137/tde-14022003-152133/
    • Vancouver

      José MO de MA, Silva Filho M de C. Inibidores de proteinase do tipo Bowman-Birk: evolução molecular, expressão na superfície de fagos filamentos e seu papel na interação planta-inseto [Internet]. 2002 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11137/tde-14022003-152133/

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