Separação de células a partir de tumor sólido por diferentes tratamentos enzimáticos (2002)
- Autor:
- Autor USP: CURI, RUI - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: FISIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Objetivos: Os tumores são geralmente constituídos por diversos tipos celulares, além das células neoplásicas. A separação dessas a partir de tumores sólidos é fundamental para o estudo mais minucioso das propriedades biológicas das neoplasias malígnas. Técnicas como citometria de fluxo, cultivo celular e testes de sensibilidade à drogas requerem a obtenção de grande número de células tumorais viáveis livres em suspensão. O objetivo desse estudo é comparar o efeito de tratamentos enzimáticos com a utilização de tripsina e de colagenase, Sigma, em diferentes atividades, quanto ao rendimento de células neoplásicas viáveis por grama de tecido tumoral. Materiais e métodos: Ratos Wistar machos foram inoculados subcutaneamente com tumor de Walker-256 na proporção de 1 ´107 células por rato. Após 14 dias os ratos foram sacrificados e com tecido tumoral obtido foram realizadas 4 incubações de 20min a 37ºC, com tripsina nas proporções de 0,25% (2625 BAEE unidades/mL) e 0,5% (5250 BAEE unidades/mL) e com colagenase nas proporções de 0,05% (224,5U/mL) e 0,1% (449U/mL), sob agitação. Ao final de cada incubação, o sobrenadante foi coletado. A suspensão de células obtida foi centrifugada, ressuspensa em meio RPMI-1640 com soro fetal bovino e apenas as células neoplásicas foram contadas em hemocitômetro e sua viabilidade analisada por exclusão de azul de TripanResultados: Células neoplásicas viáveis/g de tumor: tripsina0,25%=5,5x10e5; tripsina0,5%=5,5x10e5;colagenase0,05%=6,5x10e6; colagenase0,1%=9,3x10e6. Porcentagem de células neoplásicas não viáveis: tripsina 0,25%=9%; tripsina 0,5%=7%; colagenase 0,05%=33%; colagenase 0,1%=37%. O tratamento dos tecidos tumorais com colagenase permitiu a obtenção de um número maior de células viáveis por grama de tecido tumoral, porém a porcentagem de células mortas neste tratamento é bem maior. Portanto, se a técnica a ser utilizada para o estudo posterior exigir um número maior de células a melhor técnica de desagregação é a que utiliza colagenase
- Imprenta:
- Publisher: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2002
- Source:
- Título: Resumos
- Conference titles: Congresso Instituto Ciências Biomédicas, IV
-
ABNT
CURI, Rui. Separação de células a partir de tumor sólido por diferentes tratamentos enzimáticos. 2002, Anais.. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2002. . Acesso em: 20 jan. 2026. -
APA
Curi, R. (2002). Separação de células a partir de tumor sólido por diferentes tratamentos enzimáticos. In Resumos. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP. -
NLM
Curi R. Separação de células a partir de tumor sólido por diferentes tratamentos enzimáticos. Resumos. 2002 ;[citado 2026 jan. 20 ] -
Vancouver
Curi R. Separação de células a partir de tumor sólido por diferentes tratamentos enzimáticos. Resumos. 2002 ;[citado 2026 jan. 20 ] - In vitro effect of fatty acids on human neutrophil function and death
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