Caracterização do DNA genômico de Rhabiditis (oscheeius) psedodolichura (linhagem CEW1) (2002)
- Authors:
- Autor USP: WINTER, CARLOS EDUARDO - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: PARASITOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Objetivos: A linhagem CEW1 identificada como Rhabditis (Oscheius) pseudodolichura (Carta, USDA, comunicação pessoal) foi isolada inicialmente por Winter (Comp. Biochem. Physiol. 103B, 189, 1992), sendo usado como um modelo complementar a C. elegans. O principal objetivo deste projeto é obter informações básicas de maneira fisico-quimica sobre o DNA genômico de CEW1 e caracterizar as seqüencias de telômero de CEW1. Métodos e Resultados: DNA genômico foi isolado de nematóides crescidos em cultura líquida. O DNA foi fragmentado por passagem em agulha (21 Gauge) ou nebulizador (Inalar compact, NS Ind.), produzindo fragmentos de 3-5 kbp e 2-3 kbp respectivamente. Usando os DNAs de Escherichia coli HB101, Micrococcus luteus e Caenorhabditis elegans como marcadores de densidade, os DNAs foram centrifugados em CsCl (?=1,7284 g/cm3) com 7% acrilamida/bis-acrilamida, montados no escuro. Depois da centrifugação os tubos foram expostos à luz fluorescente por 10 minutos para polimerização. O gel de poliacrilamida foi corado com Brometo de Etídeo (EtBr). O conteúdo de GC de CEW1 foi calculado como sendo 41,53 %. O Tm foi calculado para confirmá-lo, desnaturando as mesmas amostras em espectrofotômetro GBC UV-visible (cedido pelo Dr. Arthur Gruber, FMVZ/USP/SP)Na cinética de renaturação fragmentos de DNA com cerca de 500 bp, fracionados por gradiente de Sacarose 5-20%, foram desnaturados a 100 oC, mantidos a temperatura 25 oC abaixo do Tm. A concentração deDNA dupla fita foi medida em diferentes tempos por fluorimetria. Hibridação do oligonucleotídeo (TTAGGC)27 em Southern de DNA genômico sugere que os telômeros de CEW1 são iguais aos de C. elegans e Ascaris. Análise de telômeros foi iniciada com a tentativa de construir uma pequena biblioteca enriquecida de seqüencias teloméricas em pBeloBac11. Conclusão: O conteúdo de GC de CEW1 é maior do que o de C. elegans, sendo usado o método de CsCl/poliacrilamida. CEW1 contem as mesmas repetições de telômeros comuns em nematóides
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- Publisher: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2002
- Source:
- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Congresso Instituto Ciências Biomédicas, IV
-
ABNT
AHN, I Y; WINTER, Carlos Eduardo. Caracterização do DNA genômico de Rhabiditis (oscheeius) psedodolichura (linhagem CEW1). Anais.. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2002. -
APA
Ahn, I. Y., & Winter, C. E. (2002). Caracterização do DNA genômico de Rhabiditis (oscheeius) psedodolichura (linhagem CEW1). In Resumos. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP. -
NLM
Ahn IY, Winter CE. Caracterização do DNA genômico de Rhabiditis (oscheeius) psedodolichura (linhagem CEW1). Resumos. 2002 ; -
Vancouver
Ahn IY, Winter CE. Caracterização do DNA genômico de Rhabiditis (oscheeius) psedodolichura (linhagem CEW1). Resumos. 2002 ; - Spliced leader rna genes from a brazilian free-living soil nematode
- 3' end of the vit-6bd gene codes for the yolk polypeptide vt2 from dolichorhabditis sp
- 3' end of the vit-6bd gene codes for the yolk polypeptide vt2 from dolichorhabditis sp
- Characterization of the EF-1a of Oscheius nsp (Nematoda, Rhabditida; Strain CEW1)
- Identificação e caracterização de quatro genes para eEF1A em Rhabditis (Oscheius) pseudodolichura, linhagem CEW1 (Nematoda;Rhaditida)
- Caracterização molecular do DNA genômico de Rhabditis (Oscheius) pseudodolichura (linhagem CEW1)
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