Ação da afidicolina sobre células de carcinoma de pulmão humano em cultura: indução de micronúcleos (2002)
- Authors:
- Autor USP: SANTELLI, GLAUCIA MARIA MACHADO - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: HISTOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: O aumento da freqüência de micronúcleos, considerado como um índice composto de aberrações cromossômicas em uma determinada população celular, tem sido utilizado para avaliar o potencial genotóxico de inúmeros agentes. Entretanto, a avaliação correta destes índices, quando os compostos interferem com a progressão do ciclo celular, depende da determinação paralela de parâmetros do ciclo. A afidicolina, uma micotoxina que interage com a DNA polimerase alfa impedindo a replicação do DNA e bloqueando o ciclo celular na fase S, foi utilizada para a análise da indução de micronúcleos. Outros autores utilizaram a afidicolina na indução de micronúcleos em células normais e tumorais e encontraram diferentes efeitos. Em cultura de fibroblastos normais não houve aumento significativo de micronúcleos, já em células da linhagem tumoral COLO 320DM as freqüências de micronúcleos chegaram a 19%. As células de carcinoma de pulmão humano das linhagens A549 e HK2 foram cultivadas em garrafas com meio DMEM, suplementado com 10% de SFB, sob atmosfera de 5% de CO2. Após 48h de cultivo essas células foram tratadas com meio + afidicolina nas concentrações de 0,02ug/ml; 0,05µg/ml; 0,1ug/ml e 0,2ug/ml por 3 dias e depois fixadas em formaldeído 3,7%. Para análise ao microscópio de fluorescência e microscópio confocal de varredura a laser os núcleos foram corados com Iodeto de Propídio, SYTOX® green ou por reação de imunofluorescência utilizando o anticorpo anti-lamina B. Afreqüência de micronúcleos aumentou com todas as concentrações utilizadas, alcançando até 6,5% na concentração de 0,1µg/ml. A marcação da lamina B, que é uma proteína localizada na lâmina nuclear, associada a marcação do DNA por Iodeto de Propídio ou SYTOX® green eliminou as dúvidas na classificação dos micronúcleos
- Imprenta:
- Publisher: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2002
- Source:
- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Congresso Instituto Ciências Biomédicas, IV
-
ABNT
MANELLI-OLIVEIRA, R e MACHADO-SANTELLI, Gláucia Maria. Ação da afidicolina sobre células de carcinoma de pulmão humano em cultura: indução de micronúcleos. 2002, Anais.. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2002. . Acesso em: 23 abr. 2024. -
APA
Manelli-Oliveira, R., & Machado-Santelli, G. M. (2002). Ação da afidicolina sobre células de carcinoma de pulmão humano em cultura: indução de micronúcleos. In Resumos. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP. -
NLM
Manelli-Oliveira R, Machado-Santelli GM. Ação da afidicolina sobre células de carcinoma de pulmão humano em cultura: indução de micronúcleos. Resumos. 2002 ;[citado 2024 abr. 23 ] -
Vancouver
Manelli-Oliveira R, Machado-Santelli GM. Ação da afidicolina sobre células de carcinoma de pulmão humano em cultura: indução de micronúcleos. Resumos. 2002 ;[citado 2024 abr. 23 ] - Cytoskeleton and nuclear DNA content in pleomorphic cell cultures
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