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Estudo de fatores que influenciam o processo de transformação genética em citros via Agrobacterium tumefaciens (2002)

  • Authors:
  • Autor USP: BARBOSA, JANAYNNA MAGALHÃES - ESALQ
  • Unidade: ESALQ
  • Sigla do Departamento: LCB
  • Subjects: AGROBACTERIUM; FRUTAS CÍTRICAS; MELHORAMENTO GENÉTICO VEGETAL; TRANSFERÊNCIA DE GENES
  • Language: Português
  • Abstract: A transformação genética está se tornando uma importante ferramenta, dentro dos programas de melhoramento genético de citros, e uma alternativa para contornar barreiras naturais da espécie, que dificultam o desenvolvimento de novas variedades pelo melhoramento convencional. Entretanto, os protocolos utilizados para transformação genética de citros têm resultado num baixo número de plantas transgênicas. Com o objetivo de estudar fatores que possam influenciar o processo de transformação genética de citros via Agrobacterium tumefaciens analisou-se o efeito do uso de acetoseringona em diferentes etapas do processo, as condições de incubação dos explantes durante e após o período de co-cultivo e o tipo de corte do explante. Foram utilizados segmentos de epicótilo de plântulas germinadas 'in vitro' da variedade de laranja doce 'Hamlin' (Citrus sinensis L. Osbeck.) e da variedade citrange 'Carrizo' (C. sinensis x Poncirus trifoliata Raf.), inoculados com a estirpe EHA 105 de A. tumefaciens, contendo o plasmídeo p35SGUSINT, com o gene de seleção que codifica a enzima neomicina fosfotransferase II (nptII) e o gene repórter uidA que codifica a enzima b-glucuronidase (gus). O protocolo básico para transformação genética foi com a inoculação dos explantes por 20 minutos, com o período de co-cultivo de 3 dias em meio de cultura suplementado com acetoseringona (100 mM) e transferidos para meio de cultura de seleção, constituído de meio de cultura EME, suplementado com BAP (1mgL-1), canamicina (100 mg L-1) e cefotaxime (500 mg L-1). As avaliações foram realizadas após 5-6 semanas de incubação, determinando-se o número de explantes com gemas adventícias, o número de gemas adventícias gus+ e calculando-se a eficiência de transformação genética, definida pela relação entre o número de gemas gus+ regeneradas e o número de explantes inoculados. Pelos resultados obtidos pôde-se observar uma maior eficiência de transformação ) genética para a variedade citrange 'Carrizo'; e que a eficiência da transformação genética aumentou, principalmente para a variedade de laranja doce 'Hamlin', quando a incubação do material durante o período de co-cultivo foi feita sob temperaturas inferiores a '27 GRAUS'C. A suplementação do meio de cultura de co-cultivo com acetoseringona depende do pH deste meio de cultura. A utilização de explantes seccionados longitudinalmente não se mostrou favorável devido ao crescimento excessivo da bactéria na superfície do explante
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 05.07.2002
  • Acesso à fonte
    How to cite
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    • ABNT

      BARBOSA, Janaynna Magalhães; MENDES, Beatriz Madalena Januzzi. Estudo de fatores que influenciam o processo de transformação genética em citros via Agrobacterium tumefaciens. 2002.Universidade de São Paulo, Piracicaba, 2002. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11144/tde-13092002-133324/ >.
    • APA

      Barbosa, J. M., & Mendes, B. M. J. (2002). Estudo de fatores que influenciam o processo de transformação genética em citros via Agrobacterium tumefaciens. Universidade de São Paulo, Piracicaba. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11144/tde-13092002-133324/
    • NLM

      Barbosa JM, Mendes BMJ. Estudo de fatores que influenciam o processo de transformação genética em citros via Agrobacterium tumefaciens [Internet]. 2002 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11144/tde-13092002-133324/
    • Vancouver

      Barbosa JM, Mendes BMJ. Estudo de fatores que influenciam o processo de transformação genética em citros via Agrobacterium tumefaciens [Internet]. 2002 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11144/tde-13092002-133324/


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