Desenvolvimento do processo de cultivo de Escherichia coli RR1 (2001)
- Authors:
- Autor USP: ROSSI, MARCELO - EP
- Unidade: EP
- Sigla do Departamento: PQI
- Subjects: HORMÔNIOS; CÉLULAS (CRESCIMENTO E DESENVOLVIMENTO)
- Language: Português
- Abstract: No presente trabalho, cultivou-se o microrganismo Escherichia coli RR1, contendo o vetor que carrega o gene estrutural para a síntese do hormônio de crescimento humano (hGH) (baseado no promotor pL e pR do fago 'lâmbda' sob controle do repressor termosensível cI857) em processos descontínuo e descontínuo-alimentado realizados em biorreatores com capacidade útil de 2 e 4 L. Tal cepa é auxotrófica com relação aos aminoácidos l-leucina e l-prolina e à tiamina (vitamina B1). Nos cultivos descontínuos com concentrações menores de extrato de levedura e bactotriptona em relação ao meio denominado basal, a concentração celular foi baixa, atingindo 2,4 g.'L POT. -1', com fator de conversão glicose à células de 0,25 g.'g POT. -1'. Em cultivos descontínuos com aumento (em relação ao meio basal) da concentração de extrato de levedura e de bactotriptona e com adição de l-prolina, a concentração celular alcançou valores da ordem de 5,9 g.'L POT. -1' e fator de conversão glicose à células de 0,48 g.'g POT. -1', simultaneamente à maior formação de acetato (2,5 g.L-1), este último prejudicial ao processo. Contudo, este resultado de crescimento celular não se repetiu devido à mudança do lote de células utilizado entre o primeiro e o segundo conjunto de ensaios. Os cultivos descontínuos-alimentados foram realizados com diferentes formas de alimentação bem como diferentes composições de solução de alimentação. Uma alimentação contínua com velocidade exponencial e composiçãosemelhante à do meio, pareceu ser a mais favorável, levando à concentração celular final de 9,2 g.'L POT. -1' e fator de conversão glicose a células, na fase descontínua-alimentada, de 0,36 g.'g POT. -1'. Os ensaios com indução térmica não foram eficientes provavelmente devido a problemas na detecção das concentrações de glicose existente no instante inicial da ativação da síntese do hGH. ) Esta glicose presente pode ter prejudicado a formação do hGH por conseqüência do processo fermentativo causado pelo aumento da temperatura e pela presença de elevada concentração de nutrientes complexos. O meio de cultivo utilizado possivelmente não supriu às necessidades metabólicas da célula para a síntese do hormônio de crescimento humano e em nenhum dos cultivos com indução térmica houve a produção de hGH
- Imprenta:
- Data da defesa: 29.11.2001
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ABNT
ROSSI, Marcelo. Desenvolvimento do processo de cultivo de Escherichia coli RR1. 2001. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2001. Disponível em: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-17092002-114451/. Acesso em: 07 maio 2026. -
APA
Rossi, M. (2001). Desenvolvimento do processo de cultivo de Escherichia coli RR1 (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-17092002-114451/ -
NLM
Rossi M. Desenvolvimento do processo de cultivo de Escherichia coli RR1 [Internet]. 2001 ;[citado 2026 maio 07 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-17092002-114451/ -
Vancouver
Rossi M. Desenvolvimento do processo de cultivo de Escherichia coli RR1 [Internet]. 2001 ;[citado 2026 maio 07 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-17092002-114451/
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