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Identificação, clonagem e sequência de um gene que confere sensibilidade ao ácido undecanóico em fungos (2001)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: BRITO, ANA GRACI - FMRP
  • Unidades: FMRP
  • Sigla do Departamento: RBI
  • Subjects: FUNGOS (GENÉTICA;IDENTIFICAÇÃO); BIOQUÍMICA
  • Language: Português
  • Abstract: Trichophyton rubrum é um fungo filamentoso que tem a capacidade de invadir tecidos queratinizados (pele, pêlos e unhas) humanos produzindo micoses superficiais. Atualmente as infecções fúngicas são constantes e o esclarecimento dos mecanismos de ação e de resistência a inibidores fúngicos, torna-se relevante para definirmos estratégias para a utilização destes compostos na terapêutica.O fungo ascomiceto Aspergillus nidulans é um modelo apropriado para a compreensão dos mecanismos de resistência à drogas, pois trata-se de um microrganismo de genoma pequeno e bastnte estudado do ponto de vista genético. O ácido undecanóico pode afetar a respiração, formação de pigmento ou síntese de ácidos graxos em alguns fungos. Trichophyton rubrum depende da secreção de algumas enzimas (lipases, queratinases, ect.) para parasitar seu hospedeiro, visto que estas enzimas não foram detectadas em linhagens não patogênicas (uda). Entretanto, estas linhagens, em contraste com as patogênicas ('uda POT.S'), são resistentes ao ácido undecanóico. Para o entendimento das bases moleculares da resistência dos fungos A. nidulans e T. rubrum, selecionamos mutantes resistentes ao ácido undecanóico, após irradiação com luz ultravioleta. Os dois alelos resistentes de A. nidulans denominados lipA1 e lipA2 foram mapeados no cromossomo VIII e mostraram caráter dominante. Uma biblioteca de lipA1 pabaA1 foi construída no plasmídio pUC18 (BamHI/BAP) e usada para transformar linhagens sensíveis deA. nidulans. O clone contendo o gene de resitência ao ácido undecanóico foi recuperado de linhagens de E. coli, seqüenciado (acesso nº AF315651) e seu alinhamento com sequências do GenBank revelou identidade com triacilglicerol lipases. A comparação entre a sequência dos alelos selvagem e mutante revelou a substituição de guanina por adenina na seqüência de leitura (ORF) do alelo que confere resistência ao ácido undecanóico, implicando ) alterações do aminoácido (ácido glutâmico->lisina). A identificação de um gene para uma lipase envolvida na resistência ao ácido undecanóico, é relevante pois, estas enzimas poderiam contribuir para a patogenicidade dos fungos. Enzimas, como as lipases, esterases e proteases, podem alterar processos fisiológicos ligados à membrana celular, inclusive na sensibilidade a agentes inibidores, por isto os padrões eletroforéticos e atividades enzimáticas de linhagens de A. nidulans e T. rubrum foram estudadas. A atividade lipásica da linhagem mutante de A. nidulans lipA1 pabaA1 mostrou-se reduzida tanto na ausência quanto na presença do ácido undecanóico. O perfil eletroforético de esterases, também mostrou-se alterado frente ao ácido undecanóico
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 14.09.2001

  • How to cite
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    • ABNT

      MADURRO, Ana Graci Brito; ROSSI, Antônio. Identificação, clonagem e sequência de um gene que confere sensibilidade ao ácido undecanóico em fungos. 2001.Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2001.
    • APA

      Madurro, A. G. B., & Rossi, A. (2001). Identificação, clonagem e sequência de um gene que confere sensibilidade ao ácido undecanóico em fungos. Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.
    • NLM

      Madurro AGB, Rossi A. Identificação, clonagem e sequência de um gene que confere sensibilidade ao ácido undecanóico em fungos. 2001 ;
    • Vancouver

      Madurro AGB, Rossi A. Identificação, clonagem e sequência de um gene que confere sensibilidade ao ácido undecanóico em fungos. 2001 ;

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