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Estudos cristalográficos e planejamento racional de inibidores específicos da enzima gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase glicossomal (gGAPDH) de Trypanosoma cruzi (2001)

  • Authors:
  • Autor USP: PAVÃO, FERNANDO - IQSC
  • Unidade: IQSC
  • Subjects: BIOFÍSICA; FARMACOLOGIA MOLECULAR; MATÉRIA CONDENSADA; CRISTALOGRAFIA; TRYPANOSOMA CRUZI; DOENÇA DE CHAGAS
  • Language: Português
  • Abstract: A enzima glicossomal gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase de Trypanosoma cruzi foi expressa em E. coli, purificada e submetida à ensaios de inibição da atividade enzimática e de co-cristalização. A chalepina, um derivado cumarínico, foi o mais ativo inibidor testado apresentando um 'IC IND. 50' = 64 'mü'M. A proteína e o inibidor co-cristalizaram no grupo espacial P'2 IND. 1' com parâmetros de rede a = 82.2 'ANGSTROM', b = 85.1 'ANGSTROM', c = 105.4 'ANGSTROM' e 'beta'= '96.4 GRAUS'. Há um tetrâmero, com peso molecular de 156 000 Da, na unidade assimétrica. A estrutura do complexo foi resolvida por cristalografia de raios-X revelando o modo de interação entre o inibidor e os resíduos do sítio ativo da enzima. O modelo da proteína com o inibidor ligado foi refinado utilizando um conjunto de dados com 78% de completeza, entre 15.0 e 1.95 'ANGSTROM' de resolução, com um fator R cristalográfico final de 0.204 e boa geometria. A estrutura da gGAPDH complexada mostra extensivas mudanças conformacionais quando comparada à estrutura nativa. A principal diferença entre estes dois estados conformacionais da enzima é representada por uma rotação de corpo rígido do domínio de ligação do 'NAD POT. +' relativo ao domínio catalítico, resultando em uma conformação aberta para cada monômero. A análise do complexo revelou que a chalepina possui três grupos que fazem interações importantes com a enzima. Baseados nestas informações, foram realizados estudos de modelagem molecular.Diferentes substituintes na posição C8 do anel cumarínico, juntamente com a substituição do grupo prenila (posição C3) por grupos contendo heteroátomos, foram propostos. Com base nestes dados, vários derivados, mantendo o esqueleto cumarínico, foram planejados. Resultados preliminares de síntese forneceram dois derivados cumarínicos muito simples, os quais apresentam diferentes substituintes na posição C3 do grupo lactônico. Estes compostos simples ) foram testados contra a enzima gGAPDH recombinante apresentando valores de 'IC IND. 50' abaixo de 100 'mü'M. Os resultados obtidos com os estudos de modelagem e com os ensaios de inibição proporcionam um bom suporte para a estratégia de síntese adotada, visando a obtenção de inibidores específicos da gGAPDH de T. cruzi
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 01.06.2001

  • How to cite
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    • ABNT

      PAVÃO, Fernando; OLIVA, Glaucius. Estudos cristalográficos e planejamento racional de inibidores específicos da enzima gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase glicossomal (gGAPDH) de Trypanosoma cruzi. 2001.Universidade de São Paulo, São Carlos, 2001.
    • APA

      Pavão, F., & Oliva, G. (2001). Estudos cristalográficos e planejamento racional de inibidores específicos da enzima gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase glicossomal (gGAPDH) de Trypanosoma cruzi. Universidade de São Paulo, São Carlos.
    • NLM

      Pavão F, Oliva G. Estudos cristalográficos e planejamento racional de inibidores específicos da enzima gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase glicossomal (gGAPDH) de Trypanosoma cruzi. 2001 ;
    • Vancouver

      Pavão F, Oliva G. Estudos cristalográficos e planejamento racional de inibidores específicos da enzima gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase glicossomal (gGAPDH) de Trypanosoma cruzi. 2001 ;


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