Expressão, purificação e caracterização química e funcional da proteína retinoblastoma expressa em E. coli (GST-Rb) e em células hela (2001)
- Authors:
- Autor USP: BELIZARIO, JOSE ERNESTO - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: FARMACOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: A proteína retinoblastoma é uma proteína supressora de tumor que exerce um papel-chave na regulação do ciclo celular e apoptose. Existem evidências que a atividade desta proteína na apoptose é regulada por proteólise limitada mediada por enzimas caspases. A clivagem de Rb na região interna gera os produtos p48 e p68, enquanto na região c-terminal, os produtos p95 e p5. Ainda não é entendido o papel destas clivagens no início da apoptose. O objetivo do nosso estudo é a caracterização química e funcional dos diferentes produtos de Rb gerados na apoptose induzida pelo TNF-? em células HeLa. Em uma primeira etapa deste estudo, estão sendo feitos os experimentos de purificação da proteína GST-Rb em cepa de E.coli DH-5a transformada com o vetor de expressão PGEX-2T contendo a sequência de DNA correspondente aos aminoácidos 763 à 928 da pRb fusionada a enzima GST. A proteína fusionada é induzida por IPTG e pré-purificada em resina Sepharose-Glutationa e por eluição com glutationa reduzida (20 mM). A fração purificada é submetida à eletroforese em SDS-PAGE à 15%. Experimentos de caracterização química e funcional (degradação por enzimas caspases e fosforilação por enzimas CDKs) da proteína recombinante GST-RB e pRB de células HeLa por métodos de eletroforese, imuno-detecção, fosforilação in vitro e espectrometria de massa estão em andamento
- Imprenta:
- Publisher: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2001
- Source:
- Título: Resumos
- Conference titles: Congresso do Instituto de Ciências Biomédicas
-
ABNT
SARR, A M e BELIZÁRIO, José Ernesto. Expressão, purificação e caracterização química e funcional da proteína retinoblastoma expressa em E. coli (GST-Rb) e em células hela. 2001, Anais.. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2001. . Acesso em: 11 jan. 2026. -
APA
Sarr, A. M., & Belizário, J. E. (2001). Expressão, purificação e caracterização química e funcional da proteína retinoblastoma expressa em E. coli (GST-Rb) e em células hela. In Resumos. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP. -
NLM
Sarr AM, Belizário JE. Expressão, purificação e caracterização química e funcional da proteína retinoblastoma expressa em E. coli (GST-Rb) e em células hela. Resumos. 2001 ;[citado 2026 jan. 11 ] -
Vancouver
Sarr AM, Belizário JE. Expressão, purificação e caracterização química e funcional da proteína retinoblastoma expressa em E. coli (GST-Rb) e em células hela. Resumos. 2001 ;[citado 2026 jan. 11 ] - Dermcidin differentially regulates the expression of EGF/ErbB family members in breast cancer cells
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