Interação da lectina KM+ com componentes da matriz extracelular na haptotaxia de neutrófilos (2001)
- Authors:
- Autor USP: GANIKO, LUCIANE - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RPM
- Assunto: IMUNOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: A lectina KM+ ligante de D-manose, extraída de sementes de jaca (Artocarpus integrifolia) é uma molécula tetramérica formada pela associação não-covalente de cadeias polipeptídicas de 16 kDa; cada uma delas apresentando um domínio de reconhecimento de carboidrato (CRD) (ROSA et al., 1999). KM+ tem a propriedade de induzir migração de neutrófilos através de mecanismo haptotático (SANTOS DE OLIVEIRA et al., 1993). A indicação de que KM+ possa mediar a interação de neutrófilos com componentes teciduas e, assim, promover a migração de neutrófilos do interior dos vasos para o tecido perivascular baseia-se na observação de que a radiomarcação seletiva de vaso e tecido conjuntivo frouxo, após injeção intradérmíca de 125 KM+ em ratos, correlacionou-se com a ocorrência de neutrófilos aderidos ao endotélio vascular e e infiltrado de neutrófilos no tecido perivascular (GANIKO et al., 1998). Os CRDS da molécula de KM+ estão diretamente envolvidos na interação com glicoconjugados tanto da superficie do neutrófilo como da matriz extracelular (ECM), já que D-manose inibe essa ligação. Além disso, verificou-se que o glicosaminoglicano (GAG) heparam sulfato (HS) potencializa a migração de neutrófilos "in vitro" em resposta á KM+, bem como a ligação da lectina em vasos e tecido conjuntivo de pele de rato (GANIKO et al., 1998). Essas observações fundamentaram a hipótese de que a interação de KM+ com HS seria viabilizada por um sítio distinto dos domínios quereconhecem manose. O presente trabalho consistiu na identificação de componentes glicosilados da ECM que interagem com a lectina KM+, na avaliação do papel da interação entre KM+ e componentes da ECM na haptotaxia de neutrófilos e na elucidação da suposta interação de KM+ com HS através de um domínio independente do CRD da lectina. A identificação de glicoligantes de KM+ foi feita em tecido pulmonar. Seções de pulmão de ratos incubadas com KM+ biotinilada apresentaram ) marcação em vasos alvéolos e no tecido conjuntivo. Essa marcação foi inibida através da pré-incubação de com 400 mM de D-manose ou metil-a-D-manosídeo, 10 mM da manotriose (Mana 1-3[Manal 1-6]Man) ou 10 uM de glicoproteína peroxidase (apresenta oligossacarideos contendo Mana 1-3[Mana l-6]ManB1-3GLcNAc). Através de microscopia eletrônica, os ligantes de KM+ foram localizados na superfície luminal e o citoplasma de células endoteliais, na superficie de células epiteliais alveolares, na membrana basal e no tecido conjuntivo intersticial. Laminina foi identificada como um glicoligante de KM+, pois a lectina biotinilada: (1) liga-se à membrana basal; (2) interage com laminina purificada de tumor EHS de camundongo; (3) reconhece bandas com massa molecular semelhante a das bandas reveladas pelo anticorpo anti-laminina, tanto em amostras de laminina purificada como de extrato de tecido pulmonar. Tais interações foram invariavelmente inibidas por D-manose ou peroxidase, demonstrando serem elasdependentes dos CRDs de KM+. Ensaios histoquímicos de dupla-marcação em tecido pulmonar mostraram que a ligação de KM+ colocaliza-se com a marcação de anticorpos anti-laminina na membrana basal
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2001
- Data da defesa: 16.02.2001
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ABNT
GANIKO, Luciane. Interação da lectina KM+ com componentes da matriz extracelular na haptotaxia de neutrófilos. 2001. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2001. . Acesso em: 24 abr. 2024. -
APA
Ganiko, L. (2001). Interação da lectina KM+ com componentes da matriz extracelular na haptotaxia de neutrófilos (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Ganiko L. Interação da lectina KM+ com componentes da matriz extracelular na haptotaxia de neutrófilos. 2001 ;[citado 2024 abr. 24 ] -
Vancouver
Ganiko L. Interação da lectina KM+ com componentes da matriz extracelular na haptotaxia de neutrófilos. 2001 ;[citado 2024 abr. 24 ]
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