Otimização da técnica de RT-PCR para avaliação da expressão gênica do receptor da LDL em células mononucleares periféricas de indivíduos hipercolesterolêmicos tratados com medicamentos hipolipemiantes (2000)
- Authors:
- USP affiliated authors: HIRATA, MARIO HIROYUKI - FCF ; HIRATA, ROSARIO DOMINGUEZ CRESPO - FCF
- Unidade: FCF
- Subjects: TÉCNICAS E PROCEDIMENTOS DE LABORATÓRIO; GENÉTICA; EXPRESSÃO GÊNICA; HIPERCOLESTEROLEMIA
- Language: Português
- Abstract: Foi otimizado o método de RT-PCR para avaliar a expressão gênica do receptor da LDL (RLDL) em células mononucleares periféricas (CMP), provenientes de indivíduos hipercolesterolêmicos tratados com agentes hipolipemiantes. As CMP foram isoladas apartir de 10mL de sangue periférico por centrifugação sob gradiente de Ficoll-Paque`marca registrada´ Plus. O RNA total foi extraído utilizando o reagente Trizol`marca registrada´, ressuspendido em água tratada com DEPC e quantificado porespectrofotometria a 260nm. O cDNA foi sintetizado a partir de 1 `mü´g de RNA utilizando a enzima `SuperScript ANTPOT. TM´ II RT RNAse-. A seguir, o gene do RLDL foi amplificado pela técnica de PCR. Os produtos de amplificação foram avaliadospor eletroforese em gel de agarose a 1,5% e fotografados. Os genes de gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (GAPDH) e da `beta´-actina foram amplificados como controles internos utilizando a mesma metodologia descrita. A expressão gênica do RLDLfoi determinada pelas reações entre a intensidade das bandas dos produtos amplificados do RLDL e GAPDH (RLDL?GAPDH) e do RLDL e `beta´-actina (RLDL/`beta´-actina), determinadas por densitometria das fotografias. Em resumo, o método otimizadopermite a rápida avaliação da expressão gênica do RLDL em CMP, sem a necessidade de componentes radioativos
- Imprenta:
- Publisher place: Rio de Janeiro
- Date published: 2000
- Source:
- Título: Revista Brasileira de Análises Clínicas
- Volume/Número/Paginação/Ano: v. 32, n. 3, p. 195-199, 2000
-
ABNT
NAVARRETE, Luis Antonio Salazar e HIRATA, Mario Hiroyuki e HIRATA, Rosario Dominguez Crespo. Otimização da técnica de RT-PCR para avaliação da expressão gênica do receptor da LDL em células mononucleares periféricas de indivíduos hipercolesterolêmicos tratados com medicamentos hipolipemiantes. Revista Brasileira de Análises Clínicas, v. 32, n. 3, p. 195-199, 2000Tradução . . Acesso em: 17 out. 2024. -
APA
Navarrete, L. A. S., Hirata, M. H., & Hirata, R. D. C. (2000). Otimização da técnica de RT-PCR para avaliação da expressão gênica do receptor da LDL em células mononucleares periféricas de indivíduos hipercolesterolêmicos tratados com medicamentos hipolipemiantes. Revista Brasileira de Análises Clínicas, 32( 3), 195-199. -
NLM
Navarrete LAS, Hirata MH, Hirata RDC. Otimização da técnica de RT-PCR para avaliação da expressão gênica do receptor da LDL em células mononucleares periféricas de indivíduos hipercolesterolêmicos tratados com medicamentos hipolipemiantes. Revista Brasileira de Análises Clínicas. 2000 ; 32( 3): 195-199.[citado 2024 out. 17 ] -
Vancouver
Navarrete LAS, Hirata MH, Hirata RDC. Otimização da técnica de RT-PCR para avaliação da expressão gênica do receptor da LDL em células mononucleares periféricas de indivíduos hipercolesterolêmicos tratados com medicamentos hipolipemiantes. Revista Brasileira de Análises Clínicas. 2000 ; 32( 3): 195-199.[citado 2024 out. 17 ] - Possivel relação dos polimorfismos no gene ABCB1 com as toxicidades induzidas por cisplatina em pacientes com câncer de cabeça e pescoço
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