Tese

Expressão, processamento e filogenia do precursor das sarafotoxinas (2000)

• Authors:
  • Borgheresi, Rosa Anna Maria Barbarulo
  • Carmona, Eurídice (Orientador)
• Autor USP: BORGHERESI, ROSA ANNA MARIA BARBARULO - FMVZ
• Unidade: FMVZ
• Sigla do Departamento: VPT
• Subjects: MEDICINA VETERINÁRIA; PEPTÍDEOS; RNA; AORTA; ENZIMAS
• Language: Português
• Abstract: As sarafotoxinas (Sts), peptídeos cardiotóxicos do veneno de serpentes do gênero Atractaspis, são funcional e estruturalmente muito semelhantes às endotelinas (Ets). O precursor das Sts (PSts) é um pré-propolipeptídeo com uma estrutura incomum tipo "rosário", e pouco se sabe quanto ao seu processamento. O objetivo deste trabalho foi: 1- Expressar o precursor das Sts (PSts), na levedura Pichía pastoris (Pp), para estudar o seu processamento; e 2- Detectar a presença de Sts/Ets emserpentes brasileiras. 1-Para tanto, o cDNA deste precursor foi clonado em vetor de expressão e integrado no genoma da Pp. A caracterização das proteínas expressas foi feita por espectrometria de massa, "Western blot", atividade biológica emaorta isolada de rato e de serpente Bothrops jararaca (Bj). Os resultados mostram que a Pp expressou o precursor inteiro assim como processou e fez as modificações pós-traducionais necessárias para a atividade das Sts. Portanto a Pp possui as enzimas processadoras deste precursor, sendo as kexinas responsáveis pela clivagem da pró-região, porém, as enzimas que clivam Leu-Cys e Trp-Arg/lys, que ocorrem em serpentes do gênero Atractaspís e na levedura P. pastoris permanecem desconhecidas. A Pp pode ser uma boa alternativa, para estudar essas enzimas. Além disto, o efeito contrátil das Sts em Bj sugere a presença de receptores sensíveis a estas toxinas, nesta serpente. 2-A detecção de Sts nas serpentes brasileiras mais comuns, foi feita por técnica de"Northern blot" com RNA total extraído de diferentes tecidos, usando como sonda dois fragmentos do cDNA de PSts. A hibridação destas sondas ocorreu com o RNA de todas as serpentes peçonhentas e uma não peçonhenta. Eliminada a possibilidade de homologia na seqüência da sonda com o precursor dos peptídeos potenciadores da bradicinina (BPPs), os resultados podem sugerir que as Sts/Ets podem estar presentes em alguns tecidos de serpentes brasileiras ) peçonhentas. Dada a semelhança entre Sts e Ets não podemos descartar a hipótese de reação cruzada das sondas utilizadas com as Ets. Será necessário o uso de uma sonda mais específica para as Sts
• Imprenta:
  • Publisher place: São Paulo
  • Date published: 2000
• Data da defesa: 09.06.2000

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How to cite

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• ABNT

  BORGHERESI, Rosa Anna Maria Barbarulo. Expressão, processamento e filogenia do precursor das sarafotoxinas. 2000. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2000. . Acesso em: 17 out. 2024.

• APA

  Borgheresi, R. A. M. B. (2000). Expressão, processamento e filogenia do precursor das sarafotoxinas (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo.

• NLM

  Borgheresi RAMB. Expressão, processamento e filogenia do precursor das sarafotoxinas. 2000 ;[citado 2024 out. 17 ]

• Vancouver

  Borgheresi RAMB. Expressão, processamento e filogenia do precursor das sarafotoxinas. 2000 ;[citado 2024 out. 17 ]

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