Sequência e caracterização molecular de um cDNA que codifica a Sm 21,6 de Schistosoma mansoni (2000)
- Authors:
- Autor USP: MEDEIROS, LUCIENE - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RPM
- Assunto: IMUNOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: O principal objetivo do projeto Genoma do Schistosoma é a descoberta e a caracterização de novos genes na tentativa de encontrar novos alvos para droga, o desenvolvimento de vacinas e são de grande importância para o entendimento de sua biologia, os mecanismos de resistência a drogas e variação antigênica. Uma biblioteca 'lâmbda' ZAP II de cDNA de vermes adultos, foi rastreada usando como sonda, um cDNA de S. mansoni em condições de baixa extringência (KAGEYAMA, 2000). Um dos clones positivos mostrou homologia parcial com antígenos do tegumento e foi completamente sequenciado no sequenciador ALF Express (Pharmacia) e apresentou 789 pb. Uma análise computacional (Dnasis) desse cDNA revelou uma única ORF codificando uma proteína de 183 aminoácido com uma massa molecular de 21,6 D. A comparação da sequência do peptídeo Sm 21,6 com outras seqüências membros da família de antígenos de tegumento de S. mansoni. Essa proteína mostrou sítios para glicosilação, fosforilação, miristoilação e domínio ligante de cálcio. O DNAg foi digerido com as enzimas Pst I, Eco RI, Eco RI-Xho das quais não cortam o cDNA e com Hae III que corta esse cDNA. Um "Southern blot" desse DNAg digerido, usando como sonda aocDNA da Sm 21,6 marcada ("Gene Image Kit") mostrou apenas uma cópia por genôma haplóide. A expressão desse gene não foi estágio específico pois a mensagem foi observada em cercárias, ovos, esquistossômulo e vermes adultos machos e fêmeas, por "Dot blot", RT-PCR e PCR. O vetor deexpressão pFAST-Sm 21,6 foi construído usando um procedimento de clonagem "blunt-end" e sequenciado no sequenciador automático ABI. A proteína recombinante será usada para avaliar a atividade de cálcio e produção de anticorpo. Contudo, futuras análises imunoquímicas serão relevantes para imuno-localização e para estudar imunidade de proteção
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2000
- Data da defesa: 27.10.2000
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ABNT
MEDEIROS, Luciene. Sequência e caracterização molecular de um cDNA que codifica a Sm 21,6 de Schistosoma mansoni. 2000. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2000. . Acesso em: 14 out. 2024. -
APA
Medeiros, L. (2000). Sequência e caracterização molecular de um cDNA que codifica a Sm 21,6 de Schistosoma mansoni (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Medeiros L. Sequência e caracterização molecular de um cDNA que codifica a Sm 21,6 de Schistosoma mansoni. 2000 ;[citado 2024 out. 14 ] -
Vancouver
Medeiros L. Sequência e caracterização molecular de um cDNA que codifica a Sm 21,6 de Schistosoma mansoni. 2000 ;[citado 2024 out. 14 ]
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