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Clonagem e expressão de uma potencial 'alfa'-neurotoxina de cobra coral Micrurus corallinus em Escherichia coli (2000)

  • Authors:
  • Autor USP: FIGUEIREDO, JANE OLIVEIRA DE - IQ
  • Unidade: IQ
  • Sigla do Departamento: QBQ
  • Assunto: BIOLOGIA MOLECULAR
  • Language: Português
  • Abstract: A seqüência nxhl foi isolada a partir de uma biblioteca de CDNA da glândula de veneno da cobra coral Micrurus corallinus. Essa seqüência apresenta similaridade estrutural com as toxinas de "três dígitos", e principalmente com as 'alfa'-neurotoxinas, devendo apresentar 4 pontes dissulfeto deduzidas por comparação com outras proteínas desta família. Porém, essa potencial toxina não possui alguns aminoácidos importantes para a interação com o receptor nicotínico de acetilcolina na junção neuromuscular. A potencial toxina NXH1 foi expressa em E. coli de 3 maneiras distintas. Os melhores resultados foram obtidos quando a NXH1 foi expressa em fusão com uma cauda de histidina. Essa construção permitiu uma rápida e eficiente purificação da proteína recombinante. A proteína de fusão foi usada para a produção de um soro específico anti-NXH1. O soro anti-proteína recombinante, assim como o soro do Instituto Butantan, reconheceu a toxina recombinante em Westem blot e ELISA. Além disso, o anti-NXH1 reconheceu em Westem blot apenas uma banda presente no veneno de M. corallinus, mas não reconheceu os venenos de outras 10 espécies de Micrurus. Experimentos de ligação mostraram que componentes do veneno de M. corallinus ligam-se aos receptores nicotínicos das membranas de músculo de rato. O soro anti-NXH1 não inibiu a ligação do veneno aos receptores, indicando que, ou a NXH1 não é uma 'alfa'-neurotoxina, ou o antisoro não consegue impedir a ligação da toxina nativaao receptor, ou que existem outras 'alfa'-neurotoxinas do veneno que não são bloqueadas pelo soro anti-NXH1
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 11.05.2000
  • Acesso à fonte
    How to cite
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    • ABNT

      FIGUEIREDO, Jane Oliveira de; HO, Paulo Lee. Clonagem e expressão de uma potencial 'alfa'-neurotoxina de cobra coral Micrurus corallinus em Escherichia coli. 2000.Universidade de São Paulo, São Paulo, 2000. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-31052019-090203/pt-br.php >.
    • APA

      Figueiredo, J. O. de, & Ho, P. L. (2000). Clonagem e expressão de uma potencial 'alfa'-neurotoxina de cobra coral Micrurus corallinus em Escherichia coli. Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-31052019-090203/pt-br.php
    • NLM

      Figueiredo JO de, Ho PL. Clonagem e expressão de uma potencial 'alfa'-neurotoxina de cobra coral Micrurus corallinus em Escherichia coli [Internet]. 2000 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-31052019-090203/pt-br.php
    • Vancouver

      Figueiredo JO de, Ho PL. Clonagem e expressão de uma potencial 'alfa'-neurotoxina de cobra coral Micrurus corallinus em Escherichia coli [Internet]. 2000 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-31052019-090203/pt-br.php

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