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Transformação e diferenciação de trypanosoma cruzi em meio isento de células (2000)

  • Authors:
  • Autor USP: MINELLI, LINDAMAR MARIA DE SOUZA - FMRP
  • Unidade: FMRP
  • Sigla do Departamento: RPM
  • Assunto: IMUNOLOGIA
  • Language: Português
  • Abstract: A transformação de tripomastigotas de Trypanosoma cruzi para amastigotas é uma etapa essencial na adaptação do parasita ao seu hospedeiro vertebrado. Neste trabalho, estudamos a transformação de tripomastigotas da cepa Y de T. cruzï paraamastigotas induzida pela fosfolipase C especifica para fosfatidilinositol (PI-PLC), em meio isento de células. Após 30 minutos de contato com a PI-PLC, grande parte da população de tripomastigotas apresentava-se arredondada e, pelo critërio demicroscopia óptica, com características morfológicas de amastigotas. Os tripomastigotas das cepas Tula, G e CL foram igualmente susceptiveis á transformação morfológica mediada por PI-PLC. Entretanto, nenhuma transformação foi observada emamastigotas a epimastigotas das quatro cepas analisadas. A transformação de tripomastigotas em formas arredondadas parece ser induzida especificamente pela PI-PLC, uma vez que o tratamento concomïtante com ET-18-OCH3, um inibidor especifico dePI-PLC, anulou completamente a transformação morfológica. A simples remoção de proteinas de superficie com fosfolipase C (PLC) ou corn as enzimas proteolïticas pronase, tripsina ou proteinase K não desencadeou o processo de transformação. Oprocesso de transformação morfológica dos tripomastigotas incubados com PI-PLC foi parcialmente inibido pelo prótratamento com genisteina, uma droga que inibe a atividade de proteinas tirosina quinases. A análise dos parasitas por microseopia devarredura,mostrou que a transformação dos tripomastigotas tratados com PT-PLC se inicia com o encurvamento do flagelo ao redor do parasita e se finaliza pela reintegração dessa estrutura ao citossomo. Por microscopia eletránica de transmissão,verificou-se que as formas arredondadas finais apresentam núcleos centrais arredondados a cïnetoplastos alongados, característicos de amastigotas. A análise da expressão de epítopos fase-específicos durante a transformação de tripomastigotas (continuação) para formas arredondadas, mediada pela Pf-PLC, foi analisada por microscopia confocal a por citometria de fluxo. Nossos resultados demonstraram que os parasitas tratados com PI-PL,C desenvolvem rápida e progressiva perda do epitopoSsp-3, especifico de tripomastigotas, como avaliado pela reatividade ao Mab 3C9. Durante a transformação, componentes do flagelo e da bolsa flagelar, detectados pelo Mab 4D9, sofreram redistrïbuïção, restrïngindo-se à região para-nuclear dasformas arredondadas. Após 24 horas de tratamento com PI-PLC, 3% dos parasitas eram reativos com o Mab 2C2, que reconhece o epitopo Ssp-4, uma molécula que é expressa exclusivamente pelas formas amastigotas. Em conjunto, esses dados sugerem que ahidrcrlise de proteínas ancoradas por GPI à superficie de tripomastigotas promove o remodelamento das moléculas constituintes do flagelo e a transformação de tripomastigotas para formas amastigotas, seguindo-se a expressáo do epitopo Ssp-4,específico de amastigotas
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 13.03.2000

  • How to cite
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    • ABNT

      MINELLI, Lindamar Maria de Souza; PINTO, Francisco Juarez Ramalho. Transformação e diferenciação de trypanosoma cruzi em meio isento de células. 2000.Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2000.
    • APA

      Minelli, L. M. de S., & Pinto, F. J. R. (2000). Transformação e diferenciação de trypanosoma cruzi em meio isento de células. Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.
    • NLM

      Minelli LM de S, Pinto FJR. Transformação e diferenciação de trypanosoma cruzi em meio isento de células. 2000 ;
    • Vancouver

      Minelli LM de S, Pinto FJR. Transformação e diferenciação de trypanosoma cruzi em meio isento de células. 2000 ;

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