Estudo de reparo de DNA e mutagênese em células de mamíferos empregando vetores epissomais (2000)
- Authors:
- Autor USP: JORGE, SORAIA ATTIÉ CALIL - IB
- Unidade: IB
- Sigla do Departamento: BIO
- Subjects: GENÉTICA; DNA
- Language: Português
- Abstract: Duas propostas de utilização de vetores-ponte em células de mamíferos foram descritas neste trabalho. Na primeira abordagem testamos a tecnologia de RNA "antisense" em um vetor-ponte derivado de EBV com o propósito de inibir a expressão do geneHHR6B, cuja função em células de mamíferos é desconhecida. Infelizmente, este sistema não permitiu obter resultados conclusivos a respeito da função do gene HHR6B no reparo de lesões no DNA induzidas por UV em células humanas, talvez por estafunção não ocorrer da mesma forma que ocorre com o rad6 em leveduras. Porém deve-se considerar também a possibilidade do sistema RNA "antisense" não ter sido eficiente o bastante para as análises fenotípicas, uma vez que, por limitaçõestécnicas, não possível verificar se de fato houve inibição da expressão da proteína HHR6B. Uma segunda abordagem de estudo foi proposta para avaliar os efeitos genotóxicos de lesões induzidas por ozônio ('O IND.3') no DNA. Para atingir esteobjetivo foi utilizado o vetro pR2 portador da sequência do gene vbacteriano lacZ' como alvo para estudo de mutagênese. Este vetro-ponte foi exposto a atmosfera rica em gás ozônio por diferentes períodos de tempo e então transfectado em células293-X humanas, onde houve a replicação do vetor. Os resultados obtidos revelaram que o 'O IND.3' é capaz de gerar lesões no DNA, incluindo quebras simples e duplas na molécula de DNA. Os dados indicam uma ação mutagênica do 'O IND.3' quandoadicionado diretamente àamostra de DNA. Essas mutações foram determinadas por sequenciamento de DNA e obtivemos o primeiro espectro de mutagênese induzido por 'O IND.3' em DNA replicado em células de mamíferos. Os principais eventos mutagênicosdetectados foram transversões G:C'SETA'T:A e G:C'SETA'C:G e transições G:C'SETA'A:T. As lesões envolvidas não foram detectadas, mas é provável que sejam oxidações nas guaninas, indicando uma mutagênese por 'O IND.3' dirigida a lesões nessas ) bases. A análise dos tipos de mutações, assim como o espectro de mutagênese indicam diferenças em relação à ação de outros agentes oxidantes, evidenciando que a ação do ozônio tem características específicas nos aspectos estudados
- Imprenta:
- Data da defesa: 27.04.2000
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ABNT
JORGE, Soraia Attie Calil. Estudo de reparo de DNA e mutagênese em células de mamíferos empregando vetores epissomais. 2000. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2000. . Acesso em: 29 dez. 2025. -
APA
Jorge, S. A. C. (2000). Estudo de reparo de DNA e mutagênese em células de mamíferos empregando vetores epissomais (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. -
NLM
Jorge SAC. Estudo de reparo de DNA e mutagênese em células de mamíferos empregando vetores epissomais. 2000 ;[citado 2025 dez. 29 ] -
Vancouver
Jorge SAC. Estudo de reparo de DNA e mutagênese em células de mamíferos empregando vetores epissomais. 2000 ;[citado 2025 dez. 29 ] - Expressao do antigeno de superficie do virus da hepatite b (hbsag) em celulas de mamiferos
- Insect cells respiratory activity in bioreactor
- Sf9 cells metabolism and viability when coinfected with two monocistronic baculoviruses to produce rabies virus‑like particles
- Oxygen uptake and transfer rates throughout production of recombinant baculovirus and rabies virus-like particles
- Raman laser intensity and sample clarification on biochemical monitoring over Zika-VLP upstream stages
- Sf9 cell metabolism throughout the recombinant baculovirus and rabies virus-like particles production in two culture systems
- Biochemical monitoring throughout all stages of rabies virus-like particles production by Raman spectroscopy using global models
- Chemometrics and analytical blank on the at-line monitoring of Zika-VLP production using near-infrared spectroscopy
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- Optimization of inoculum preparation stage of BHK-21 cells for suspension culture in bioreactors
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