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Gene supressor de tumor reck: clonagem e caracterização do promotor e regulação de sua expressão (2000)

  • Authors:
  • Autor USP: SASAHARA, REGINA MAKI - IQ
  • Unidade: IQ
  • Sigla do Departamento: QBQ
  • Assunto: BIOLOGIA MOLECULAR
  • Language: Português
  • Abstract: A expressão do gene RECK é ubíqua em tecidos normais e não detectável nas linhagens celulares tumorais testadas e em fibroblastos transformados por diversos oncogenes. Inicialmente isolado como um gene indutor da reversão fenotípica tumoral'seta' normal em fibroblastos transformados por v-Ki-ras, o gene RECK codifica uma glicoproteína de membrana que suprime a invasão tumoral e metástase através da regulação da metaloprotease de matriz-9. Para entender os mecanismos de inibição da expressão do gene RECK, mediada por oncogenes, isolou-se e caracterizou-se a região 5'- flanqueadora do gene RECK de camundongo (mRECK). Ensaios de atividade promotora utilizando mutantes de deleção da região 5'- flanqueadora e o gene repórterluciferase, revelaram que a sequência de 52 pb, imediatamente "upstream" ao gene, possui uma atividade promotora que é suprimida pelo produto do oncogene Ha-ras (V12). Esta seqüência contém dois sítios de ligação a Sp1 (Sp1 A e Sp1B), um sítio de ligação a cEBPb e um CAAT box. EMSAs e ensaios de atividade promotora, utilizando mutantes pontuais nestes sítios, revelaram que as proteínas Sp1 e Sp3 se ligam a ambos os sítios Sp1, e que a resposta a Rãs é mediada apenas pelo sítio Sp1B. Análise por 'Southern blot' utilizando uma enzima de restrição sensível à metilação e por Northern blot de MRNA extraído de células tratadas com um agente desmetilante, sugeriram que o mecanismo de metilação de DNA não está envolvido na regulação transcricional do geneRECK. O envolvimento de RECK em diversos sistemas de proliferação, invasão e reversão celular foi analisado através de 'Northem blot'. Os resultados sugerem que a expressão de RECK é regulada por soro na linhagem A31 de fibroblastos normais de camundongo
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 10.01.2000
  • Acesso à fonte
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    • ABNT

      SASAHARA, Regina Maki; SOGAYAR, Mari Cleide. Gene supressor de tumor reck: clonagem e caracterização do promotor e regulação de sua expressão. 2000.Universidade de São Paulo, São Paulo, 2000. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-05072019-141348/pt-br.php >.
    • APA

      Sasahara, R. M., & Sogayar, M. C. (2000). Gene supressor de tumor reck: clonagem e caracterização do promotor e regulação de sua expressão. Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-05072019-141348/pt-br.php
    • NLM

      Sasahara RM, Sogayar MC. Gene supressor de tumor reck: clonagem e caracterização do promotor e regulação de sua expressão [Internet]. 2000 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-05072019-141348/pt-br.php
    • Vancouver

      Sasahara RM, Sogayar MC. Gene supressor de tumor reck: clonagem e caracterização do promotor e regulação de sua expressão [Internet]. 2000 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-05072019-141348/pt-br.php

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