Tese

Caracterização da localização centrossomal da miosina-va e análise de sua expressão em células mitóticas e interfásicas (1999)

• Authors:
  • Krogh, Karin
  • Espreafico, Enilza Maria (Orientador)
• Autor USP: KROGH, KARIN - FMRP
• Unidade: FMRP
• Sigla do Departamento: RMF
• Assunto: MORFOLOGIA (ANATOMIA)
• Language: Português
• Abstract: O presente trabalho estende os estudos de localização da miosina-Va no centrossomo, previamente reportados por Espreafico et al (PNAS, 95:8636, 1998) a Wu et al. (Cell Motil. Cytosk. 40:286, 1998), investigando o papel do citoesqueleto nesta localização e o mapeamento do sítio de endereçamento da proteína à organela. Mostra também análises quantitativas da expressão miosina-Va em células interfásicas e mitóticas. Após tratamento das células de melanoma B 16-F 10 a células de striavascularis do ouvido (SV-kl) com substâncias que induzem a despolimerização de microtúbulos ou filamentos de actina, observamos que a localização da miosina-Va no centrossomo é dependente da rede microtúbulos, mas não dos filamentos de actina. Em centrossomos isolados, demonstramos, por imunofluorescência, que a miosina-Va ainda persiste, ao menos em uma parcela dos centrossomos. Espreafico et al. (1998 idem) e Tsakraklides et al. (J. Cell Sci., 112:2853, 1999) mostraram que o sítiode endereçamento da miosina-Va ao centrossomo localiza-se no domínio da cauda da miosina-Va de cérebro de galinha (aa 1377-1830). Mostramos aqui que a cauda globular é também endereçada ao centrossomo em outros tipos celulares. Obtivemos três novas construções desta região da cauda, em fusão com a green fluorescent protein (GFP): M-GTl (aa 1377-1657), GT (aa 1423-1830) a GT2 (aa 16451830). A transfecção destas construções em diferentes tipos celulares permitiu-nos demonstrar que o sítioresponsável pelo endereçamento da miosina-Va ao centrossomo encontra-se no início da sequência da cauda globular (entre os aminoácidos 1423 a 1645). A construção GT, além de se localizar no centrosssomo, apresentou, também, localização nuclear, já a construção GT2 mostrou distribuição de aspecto granular ocupando todo o citoplasma. Observamos que a diferença no nível de expressão de miosina-Va entre célula mitótica e interfásicas, com base em análises de intensidade de ) fluorescência por área celular e Western blotting. Esta última análise forneceu indício de que, em mitose, a miosina-V possa sofrer modificações pós traducionais distintas daquelas em intérfase. Em conjunto os resultados apresentados no presente trabalho contribuem para o nosso entendimento dos mecanismos de endereçamento da miosina-Va ao centrossomo a começam a revelar alguns aspectos dessa proteina nos diferentes estágios do ciclo celular
• Imprenta:
  • Publisher place: Ribeirão Preto
  • Date published: 1999
• Data da defesa: 22.11.1999

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How to cite

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• ABNT

  KROGH, Karin. Caracterização da localização centrossomal da miosina-va e análise de sua expressão em células mitóticas e interfásicas. 1999. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 1999. . Acesso em: 29 set. 2024.

• APA

  Krogh, K. (1999). Caracterização da localização centrossomal da miosina-va e análise de sua expressão em células mitóticas e interfásicas (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.

• NLM

  Krogh K. Caracterização da localização centrossomal da miosina-va e análise de sua expressão em células mitóticas e interfásicas. 1999 ;[citado 2024 set. 29 ]

• Vancouver

  Krogh K. Caracterização da localização centrossomal da miosina-va e análise de sua expressão em células mitóticas e interfásicas. 1999 ;[citado 2024 set. 29 ]

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