Caracterização molecular do gene NtSAT1 de fumo (Nicotiana tabacum) (1999)
- Authors:
- Autor USP: OTSU, CLAUDIA TOMIKO - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RGM
- Assunto: GENÉTICA
- Language: Português
- Abstract: O pistilo é um órgão de importância central na reprodução de plantas. Este órgão produz o gametófito feminino a discrimina entre os diferentes tipos de grãos de pólen recebidos, a portanto, exerce um papel decisivo na determinação do genótipo do futuro embrião a planta. Uma abordagem molecular foi usada para identificar a caracterizar genes predominantemente expressos neste órgão a para estabelecer suas possíveis funções no desenvolvimento do pistilo, na polinização e nas interações pólen-pistilo. Neste trabalho, foi isolado a caracterizado um clone genômico correspondendo a um clone de cDNA de expressão predominante no pistilo (pMG13) Este cDNA codifica uma proteína contendo os motivos Walker A e Walker B, além de possuira "ABC signature", o que sugere que seja um transportador ABC a portanto, foi designado como NtSAT1 (Nicotiana tabacum Stigma/style ABC Transporter). Entretanto, este clone estava incompleto na região 3.O clone genómico foi obtido por um procedimento de "screening" de uma biblioteca genômica de Nicotiana tabacum, usando o clone de cDNA como sonda. Um fragmento de 11 kb deste clone genômico, compreendendo o gene NtSAT1, foi subclonado como dois segmentos no vetor plasmidial pUC18O -mapa de restrição destes subclones genômicos foi construído e a informação foi usada para fazer subclones menores de aproximadamente 1, 5kb a facilitar o sequenciamento. Após o sequenciamento de uma região de 4kb, foi possível determinar que esta região contém opromotor e a região codificadora completa do gene NtSAT1. Uma comparação entre os clones genómico a de cDNA mostrou que este gene não contém introns a codifica uma cadeia polipeptídica de i 3g aminoácido. A seqüência deduzida de aminoácidos tem uma homologia muita alta com uma putativa proteína white de Arabidopsis fhaliana, assim como tem homologia com a proteína white de Drosophila e a proteína ADP1 de levedura. A proteína NtSAT1 possui um domínio ) (continua) N-terminal que é um sítio putativo de ligação a nucleotídeos, contendo os motivos Walker A, a "ABC signatures" e o Walker B; a região C-terminal é um outro domínio contendo cinco putativos segmentos membranares hidrofóbicos. Este resultado indica que o gene NtSAT1 codifica a metade de um transportador ABC funcional. A cadeia polipeptídica aqui descrita deve ïnteragir com uma outra cadeia polipeptídica para formar um transportador ativo, como homodímero ou como heterodímero. Uma análise por Northern blot demonstrou que o gene NtSAT1 é regulado temporalmente a que o nível de expressão aumenta durante o desenvolvimento em direção a antese. Como um todo, os resultados obtidos sugerem que NtSAT1 tem um papel importante no processo reprodutivo
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 1999
- Data da defesa: 16.09.1999
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ABNT
OTSU, Cláudia Tomiko. Caracterização molecular do gene NtSAT1 de fumo (Nicotiana tabacum). 1999. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 1999. . Acesso em: 30 set. 2024. -
APA
Otsu, C. T. (1999). Caracterização molecular do gene NtSAT1 de fumo (Nicotiana tabacum) (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Otsu CT. Caracterização molecular do gene NtSAT1 de fumo (Nicotiana tabacum). 1999 ;[citado 2024 set. 30 ] -
Vancouver
Otsu CT. Caracterização molecular do gene NtSAT1 de fumo (Nicotiana tabacum). 1999 ;[citado 2024 set. 30 ]
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