Análise molecular dos polipeptídeos codificados no gene CEW1-vit-6 do nematóide Oscheius n.sp (1999)
- Authors:
- Autor USP: SCARABOTTO, CRISTIANE PENHA - ICB
- Unidade: ICB
- Sigla do Departamento: BMP
- Subjects: ANIMAIS PARASITOS; CAENORHABDITIS; NEMATOIDES
- Language: Português
- Abstract: No presente trabalho analisamos o gene CEW1-vit-6, um dos genes de vitelogenina do nematóide de vida livre Oscheius n.sp., e aspectos estruturais e funcionais da proteína codificada nele (CEW1-VIT-6). CEW1-vit-6 é provavelmente um gene de cópiaúnica, assim como seu homólogo em C. elegans (Ce-vit-6), cujo transcrito apresenta variações no sítio de poliadenilação e no local de inserção de cauda de poli (A) comparado aos de mamíferos. A ausência da seqüência AAUAAA nos 419pb ajusante ("dowstream") do DNA genômico sugere que o hexanucleotídeo AGUAAA seja o sinal de poliadenilação de seu transcrito. CEW1-vit-6 codifica uma proteína precursora, CEW1-VIT-6, que é processada dando origem aos polipeptídeos VT2 e VT3. A expressão dos 250 aminoácidos C-terminais da proteína CEW1-VIT-6 permitiu a obtenção de um anti-soro específico para a proteína recombinante P26. Ensaios de imuno localização utilizando o soro anti-P26 mostraram a especificidade dele contraproteínas dovitelo de CEW1. A utilização deste anti-soro em experimentos de "immunoblotting" permitiu localizar a seqüência do polipeptídeo VT2 na região carboxi-terminal da proteína precursora CEW1-VIT-6. Uma região central da vitelogenina foi também expressada em E. coli, se mostrando altamente insolúvel.O alinhamento de seqüências de amino ácidos das vitelogeninas de nematóides e de lampréia, serviram para compreendermos melhor a função dos diferentes domínios da vitelogenina de CEW1, onde verificamosque a região abrangida pelo polipeptídeo recombinante P49 corresponderia a parte de domínios (a-hélice e folha b pregueada) que incluem resíduos envolvidos na montagem do bolso hidrofóbico da vitelogenina responsável pelo transporte de lipídeos. A região que contém a seqüência de amino ácidos do polipeptídeo P26 corresponderia a uma região não estruturada e com baixo conteúdo de amino ácidos hidrofóbicos, o que explicaria sua solubilidade. Experimentos utilizando-se Concanavalina A mostraram que os três polipeptídeos que compõem o vitelo de CEW1 são glicosilados, sendo que polipeptídeo VT3 reage mais com Con A do que os demais polipeptídeos, sugerindo ou que ele apresente maior número de resíduos glicosídicos reconhecidos por Con A ou que estesestejam mais acessíveis à lectina
- Imprenta:
- Data da defesa: 30.06.1999
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ABNT
SCARABOTTO, Cristiane Penha. Análise molecular dos polipeptídeos codificados no gene CEW1-vit-6 do nematóide Oscheius n.sp. 1999. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 1999. . Acesso em: 03 out. 2024. -
APA
Scarabotto, C. P. (1999). Análise molecular dos polipeptídeos codificados no gene CEW1-vit-6 do nematóide Oscheius n.sp (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. -
NLM
Scarabotto CP. Análise molecular dos polipeptídeos codificados no gene CEW1-vit-6 do nematóide Oscheius n.sp. 1999 ;[citado 2024 out. 03 ] -
Vancouver
Scarabotto CP. Análise molecular dos polipeptídeos codificados no gene CEW1-vit-6 do nematóide Oscheius n.sp. 1999 ;[citado 2024 out. 03 ]
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