Exportar registro bibliográfico

Estudos estruturais e cinéticos da enzima gliceraldeído-3-fosfato desidorgenase de Trypanosoma cruzi e mutantes D210L, D210l-G213D (1998)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: GUIMARÃES, BEATRIZ GOMES - IFSC
  • Unidades: IFSC
  • Sigla do Departamento: FFI
  • Subjects: PROTEÍNAS; ENZIMAS; BIOLOGIA MOLECULAR
  • Language: Português
  • Abstract: A enzima glicossomal gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (GAPDH) de Trypanossoma cruzi e os mutantes D210L e D10L-G213D foram expressos em E. coli, purificados e submetidos a ensaios de cinética enzimática e de cristalização. A enzima GAPDH tipo selvagem e o mutante D210L-G213D cristalizaram-se no grupo espacial 'P2 IND. 1' e os cristais apresentaram padrões de difração de raios-X de boa qualidade. A estrutura cristalográfica da enzima tipo selvagem foi determinada a 2.5 e 2.15 'ANGSTRON' de resolução, a partir de coletas de dados realizadas a 277 e 100 K respectivamente. Os fatores R cristalográficos finais dos refinamentos foram de 16.0% para a estrutura a 277 K e 18,8% para a estrutura a 100 K. A estrutura do mutante GAPDH D210L-G213D foi determinada a 2.15 'ANGSTRON' de solução e refinada até um fator R cristalográfico de 18,9%. A comparação entre as estruturas da enzima tipo selvagem determinadas nas duas temperaturas levou a resultados interessantes no que diz respeito ao empacotamento cristalino. O resfriamento dos cristais provocou uma redução no volume da cela unitária de 10,5%, tendo a maior variação ocorrido no parâmetro de rede 'alfa' (14,5%). A sobreposição das celas unitárias mostrou uma rotação do conteúdo da unidade assimétrica de cerca de 5 graus em torno de um eixo aproximadamente paralelo a b. Por outro lado, a análise das estruturas da enzima tipo selvagem e mutante, juntamente com os parâmetros cineticos, permitiram a discussão a respeito de algunsdetalhes do mecanismo catalítico da enzima, principlamente no que se refere ao papel do resíduo Arg249. Tal resíduo, que apresenta grande mobilidade conformacional de sua cadeia lateral, parece estar envolvido na etapa de reorientação de um dos intermediários durante o processo catalítico
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 11.09.1998
  • Online source access
    How to cite
    A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas

    • ABNT

      GUIMARÃES, Beatriz Gomes; OLIVA, Glaucius. Estudos estruturais e cinéticos da enzima gliceraldeído-3-fosfato desidorgenase de Trypanosoma cruzi e mutantes D210L, D210l-G213D. 1998.Universidade de São Paulo, São Carlos, 1998. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-18062008-081424/ >.
    • APA

      Guimarães, B. G., & Oliva, G. (1998). Estudos estruturais e cinéticos da enzima gliceraldeído-3-fosfato desidorgenase de Trypanosoma cruzi e mutantes D210L, D210l-G213D. Universidade de São Paulo, São Carlos. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-18062008-081424/
    • NLM

      Guimarães BG, Oliva G. Estudos estruturais e cinéticos da enzima gliceraldeído-3-fosfato desidorgenase de Trypanosoma cruzi e mutantes D210L, D210l-G213D [Internet]. 1998 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-18062008-081424/
    • Vancouver

      Guimarães BG, Oliva G. Estudos estruturais e cinéticos da enzima gliceraldeído-3-fosfato desidorgenase de Trypanosoma cruzi e mutantes D210L, D210l-G213D [Internet]. 1998 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-18062008-081424/

    Últimas obras dos mesmos autores vinculados com a USP cadastradas na BDPI:

    Digital Library of Intellectual Production of Universidade de São Paulo     2012 - 2020