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Expressao em e. Coli, purificacao e caracterizacao parcial do dominio ligante de calmodulina da miosina-v de cerebro de galinha (1996)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: ALCANTARA, LUIZ CARLOS JUNIOR - FMRP
  • Unidades: FMRP
  • Sigla do Departamento: RBQ
  • Subjects: BIOQUÍMICA
  • Language: Português
  • Abstract: O dominio pescoco da misonia-v, entre os residuos 765 e 909, contem uma serie de 6 repeticoes imperfeitas de aproximadamente 23 aminoaciodos ricas em residuos hidrofobicos e basicos e apresentam a sequencia concenso iqxxxrgxxxrxxy, denominada motivo-iq. O motivo-iq tambem esta presente em todas as outras miosinas conhecidas, na regiao correspondente aos sitios ligantes de cadeias leves. Recentemente, as estrutuas tri-dimensionais da regiao ligante de cadeias leves da miosina-ii de musculo esqueletico de galinha e de scallop foram resolvidas, demonstrando que o motivo-iq e o sitio de ligacao das cadeias leves essencial e regulatoria. O trabalho resultou na expressao em e. Coli do dominio pescoco em fusao com a proteina ligante de maltose e sua purificacao atraves de cromatografia de afinidade. Observou-se ligacao da proteina de fusao a calmodulina com ou sem 'CA POT.2+' e alta forca ionica. A ligacao com ou sem 'CA POT.2+' foi confirmada usando os ensaios de overlay com 'CA'-m-biotinilada como uma sonda e estreptavidina conjugada a fosfatase alcalina como sistema de deteccao. Tambem o complexo formado entre o pescoco expresso e a calmodulina biotinilada em solucao foi capturada por esferas magneticas ligadas a estreptavidina com ou sem 'CA POT.2+'. Foi possivel clivar a proteina de fusao, utilizando o fator xa de coagulacao bovina, liberando o dominio pescoco livre da plm
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 20.03.1996

  • How to cite
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    • ABNT

      ALCANTARA, Luiz Carlos Junior; LARSON, Roy Edward. Expressao em e. Coli, purificacao e caracterizacao parcial do dominio ligante de calmodulina da miosina-v de cerebro de galinha. 1996.Universidade de São Paulo, Ribeirao Preto, 1996.
    • APA

      Alcantara, L. C. J., & Larson, R. E. (1996). Expressao em e. Coli, purificacao e caracterizacao parcial do dominio ligante de calmodulina da miosina-v de cerebro de galinha. Universidade de São Paulo, Ribeirao Preto.
    • NLM

      Alcantara LCJ, Larson RE. Expressao em e. Coli, purificacao e caracterizacao parcial do dominio ligante de calmodulina da miosina-v de cerebro de galinha. 1996 ;
    • Vancouver

      Alcantara LCJ, Larson RE. Expressao em e. Coli, purificacao e caracterizacao parcial do dominio ligante de calmodulina da miosina-v de cerebro de galinha. 1996 ;

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