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Construcao e uso de sondas de acidos nucleicos para a deteccao e diagnose do virus do anel do pimentao (vap) (1995)

  • Authors:
  • Autor USP: LOPES, MARIO LUCIO - CENA
  • Unidade: CENA
  • Sigla do Departamento: SD
  • Subjects: HORTICULTURA; ESTRUTURA MOLECULAR (QUÍMICA TEÓRICA)
  • Language: Português
  • Abstract: O RNA de fita simples obtido das partículas purificadas do VAP e, formas replicativas isoladas através da cromatografia com celulose CF-11, foram utilizadas como sondas para a detecção do vírus. A construção das sondas foi realizada em quatro etapas distintas que compreenderam a eletroforese e eluição do RNA viral a partir dos géis de agarose, hidrólise alcalina parcial, preparo dos marcadores e marcação com fotobiotina ou citocromo C biotinilado. As reações de hibridização sobre as membranas foram visualizadas com o conjugado avidina-fosfatase alcalina, através da formação de precipitados colorimétricos. Os quatro critérios considerados na escolha da estratégia de marcação foram, o limite de detecção, a especificidade das sondas, reação de fundo e facilidade de execução. Os dois métodos avaliados não apresentaram grandes diferenças quanto à especificidade e reação de fundo mas apesar da maior facilidade de marcação das sondas com citocromo C biotinilado, a marcação direta com fotobiotina foi preferida por ter alcançado um limite de detecção maior. As sondas de RNA possibilitaram a detecção do VAP em reação de "Dot Blot", "Northen Blot" e nas impressões de tecidos vegetais sobre membranas de nitrocelulose
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 10.03.1995

  • How to cite
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    • ABNT

      LOPES, Mario Lucio; SILVA, Darcy Martins da. Construcao e uso de sondas de acidos nucleicos para a deteccao e diagnose do virus do anel do pimentao (vap). 1995.Universidade de São Paulo, Piracicaba, 1995.
    • APA

      Lopes, M. L., & Silva, D. M. da. (1995). Construcao e uso de sondas de acidos nucleicos para a deteccao e diagnose do virus do anel do pimentao (vap). Universidade de São Paulo, Piracicaba.
    • NLM

      Lopes ML, Silva DM da. Construcao e uso de sondas de acidos nucleicos para a deteccao e diagnose do virus do anel do pimentao (vap). 1995 ;
    • Vancouver

      Lopes ML, Silva DM da. Construcao e uso de sondas de acidos nucleicos para a deteccao e diagnose do virus do anel do pimentao (vap). 1995 ;

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