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Clonagem e expressão do gene da proteina de 18 k da de Mycobacterium leprae em Saccharomyces cerevisiae (1992)

  • Authors:
  • Autor USP: PIESTUN, VALERIA SEDRANI - ICB
  • Unidade: ICB
  • Sigla do Departamento: BMI
  • Assunto: IMUNOLOGIA
  • Language: Português
  • Abstract: A hanseniase e uma doenca infecciosa cronica causada pelo bacilo mycobacterium leprae que atinge de 10 a 15 milhoes de pessoas em todo mundo. O desenvolvimento de um diagnostico preciso de uma imunoprofilaxia eficiente sao fatores de grande importancia no controle epidemiologico da doenca. Dentre os antigenos do m.Leprae, a proteina de 18 kda mostrou-se uma das mais antigenicas, sendo responsavel pela proliferacao de linfocitos auxiliares in vitro. O gene que codifica esta proteina foi identificado atraves da construcao de uma biblioteca em fago lambda gt11, o que possibilitou sua clonagem e sequenciamento. Com a finalidade de se obter grandes quantidades dessa proteina em sua forma nao glicosilada, fez-se a clonagem do gene codificando a proteina de 18kda em vetor de expressao intracelular de s.Cerevisiae, utilizando o promotor gal1 de levedura. Celulas de levedura da linhagem 334 transformadas com este plasmidio denominado pv218, expressam a proteina de 18kda quando induzidas com 0,5% de galactose em meio ypd, por 48hs a 30 graus c. Nestas condicoes, obtem-se cerca de 10mg da proteina heterologa por litro de cultura. Foi desenvolvido protocolo de purificacao envolvendo cromatografia em deae-sephacel seguida de cromatografia em hidroxiapatita
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 14.12.1992

  • How to cite
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    • ABNT

      PIESTUN, Valeria Sedrani; MOREIRA-FILHO, Carlos Alberto. Clonagem e expressão do gene da proteina de 18 k da de Mycobacterium leprae em Saccharomyces cerevisiae. 1992.Universidade de São Paulo, São Paulo, 1992.
    • APA

      Piestun, V. S., & Moreira-Filho, C. A. (1992). Clonagem e expressão do gene da proteina de 18 k da de Mycobacterium leprae em Saccharomyces cerevisiae. Universidade de São Paulo, São Paulo.
    • NLM

      Piestun VS, Moreira-Filho CA. Clonagem e expressão do gene da proteina de 18 k da de Mycobacterium leprae em Saccharomyces cerevisiae. 1992 ;
    • Vancouver

      Piestun VS, Moreira-Filho CA. Clonagem e expressão do gene da proteina de 18 k da de Mycobacterium leprae em Saccharomyces cerevisiae. 1992 ;

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