Estudos da regulação de metabólitos secundários empregando diferentes ferramentas de metabolômica monitoradas por UHPLC-MS (2017)
- Authors:
- Autor USP: RODRIGUES, JÚLIA PEREIRA - FFCLRP
- Unidade: FFCLRP
- Sigla do Departamento: 593
- Subjects: BIOQUÍMICA; METABÓLITOS SECUNDÁRIOS; METABÓLITOS SECUNDÁRIOS; ESPECTROMETRIA DE MASSAS
- Language: Português
- Abstract: Metabólitos secundários microbianos constituem uma poderosa fonte de novas moléculas com estruturas químicas intrínsecas e com potentes atividades biológicas. De uma maneira geral, as linhagens microbianas isoladas da natureza produzem quantidades discretas de um metabólito secundário em particular. A sua identificação possibilita a otimização da produção do metabólito de interesse. Os métodos atuais para aumentar a produtividade de uma linhagem vão desde as otimizações dos processos fermentativos até as tecnologias de DNA recombinante e estas têm criado novas oportunidades para aumentar o rendimento da produção de metabólitos secundários de interesse, além de sugerirem a existência de um grande número de genes silenciados ou reprimidos. Neste contexto, realizou-se um conjunto de técnicas: OSMAC (One Strain Many Compounds), planejamento fatorial central composto (CCD) e a engenharia ribossômica. Através das análises de OSMAC, conseguiu-se selecionar o meio de cultivo ISP-2 como meio de cultivo mais eficiente, assim como a fonte de carbono sacarose como mais eficaz na produção dos metabólitos secundários. Foi verificado que a adição de cloreto e fosfato ao meio de cultivo influencia o metabolismo secundário. Com a adição de metais ao meio de cultivo, conseguiu-se observar o efeito indutor ou tóxico. O planejamento central composto (CCD) foi o método estatístico aplicado, em que obteve-se um modelo matemático significativo e preditivo para a otimização do meio de cultivo. Com a engenharia ribossômica observou-se o aumento da produção dos metabólitos secundários através da indução de resistência com antibióticos da classe dos aminoglicosídeos. Na área dos produtos naturais não somente os extratos podem ser analisados como também as próprias colônias. Essa análise direta permite detectar os metabólitos produzidos, interações intra e interespéciesassim como realizar o mapeamento espacial destes, representando uma grande área de estudo entre a microbiologia e a espectrometria. Neste trabalho foi realizado uma análise espacial e temporal dos metabólitos secundários utilizando como ferramenta o DESI-IMS. O mapeamento temporal e espacial dos metabólitos, assim como os ensaios de inibição com diferentes alvos aplicados com o extrato bruto utilizando o DESI-IMS, a fim de identificar a localização espacial dos compostos e os metabólitos secundários ativos envolvidos no processo de inibição de fungos e bactérias cumpriram as metas propostas. Através destes, compreendeu-se melhor o metabolismo secundário da actinobactéria em questão. E mostrou que os compostos em estudo estão envolvidos no processo de inibição contra patógenos externos. As variadas técnicas de metabolômicas aplicadas cumpriram seus propósitos, obtendo um aumento da produção dos metabólitos, assim como que a aplicação da espectrometria de massas em seus diferentes modos possibilitou um estudo amplo e completo dos micro-organismos, além de uma rápida identificação de compostos microbianos
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2017
- Data da defesa: 22.09.2017
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ABNT
RODRIGUES, Júlia Pereira. Estudos da regulação de metabólitos secundários empregando diferentes ferramentas de metabolômica monitoradas por UHPLC-MS. 2017. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2017. . Acesso em: 26 abr. 2024. -
APA
Rodrigues, J. P. (2017). Estudos da regulação de metabólitos secundários empregando diferentes ferramentas de metabolômica monitoradas por UHPLC-MS (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Rodrigues JP. Estudos da regulação de metabólitos secundários empregando diferentes ferramentas de metabolômica monitoradas por UHPLC-MS. 2017 ;[citado 2024 abr. 26 ] -
Vancouver
Rodrigues JP. Estudos da regulação de metabólitos secundários empregando diferentes ferramentas de metabolômica monitoradas por UHPLC-MS. 2017 ;[citado 2024 abr. 26 ] - Characterization and mapping of secondary metabolites of Streptomyces sp. from caatinga by desorption electrospray ionization mass spectrometry (DESI-MS)
- Solid phase microextraction as a powerful alternative for screening of secondary metabolites in actinomycetes.
- Bioguided isolation, characterization and media optimization for production of Lysolipins by actinomycete as antimicrobial compound against Xanthomonas citri subsp. citri
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