Expressão da PKR e de microRNAs envolvidos na regulação do PACT (ativador da PKR) em carcinomas mamárias ductais in situ e invasivo (2013)
- Authors:
- Autor USP: GARCIA, PATRICIA RONDINELLI DARIN - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBI
- Subjects: RNA; CARCINOMA; MAMA; REGULAÇÃO BACTERIANA DA EXPRESSÃO GÊNICA
- Language: Português
- Abstract: A proteína quinase dependente de RNA (PKR) desempenha um papel fundamental em vários processos celulares tais como apoptose, diferenciação e proliferação celular. Verificou-se que ocorre um aumento da expressão e atividade da PKR em carcinoma mamário humano, porém os mecanismos moleculares deste fenômeno não foram ainda elucidados. A proteína PACT (PKR activating protein) é um ativador da PKR e a expressão do PACT é controlada pelo fator de transcrição Spl (Specific proteinl ). Por outro lado, a proteína TRBP (TAR RNA binding protein) atua como um inibidor da PKR. O presente estudo foi realizado com amostras de tecido fixadas em forrnalina e embebidas em parafina (FFPE) e preparadas a partir da biópsia de pacientes com carcinoma ductal in situ (CDIS) e invasivo (CDI). Com o desenvolvimento recente de métodos de extração de rnicroRNAs (miRNAs) a partir de amostras FFPE, foi possível investigar se os eventos moleculares detectados em cultura de células tumorais ocorrem também no tecido tumoral no momento da biópsia. O objetivo principal deste estudo foi investigar se a regulação da expressão do Spl e do PACT por miRNAs, bem como a inibição da PKR pela TRBP, descritas em células tumorais, seriam também observados em amostras FFPE de CDIS e CDI. A localização intracelular da PKR e a expressão dos miR-886-3p e miR-886-5p envolvidos em proliferação celular, foram também investigados nestas amostras FFPE. Os nossos resultados revelaram que: 1. O miRNA-29b regula negativamente a expressão do Spl, confirmando que o Spl é alvo direto do miR-29b; 2. O miRNA-122 inibe a expressão do PACT, o que está de acordo com os dados obtidas em culturas de células tumorais que mostraram que o PACT é alvo direto do miR-122; 3. O aumento da expressão da TRBP sugere que esta proteína estaria inibindo a atividade da PKR; 4. A redução da expressão do miR-886-3p poderá resultar no aumento daexpressão do seu alvo CDC6 (initiator protein cell division cycle 6); 5. A super-expressão do miR-886-5p resultaria na inibição da expressão da proteína pró-apoptótica Bax (Bc1-2 associate X protein), a qual foi validada como alvo deste miRNA; 6. A análise imunohistoquímica mostrou que a expressão da PKRt (formas inativa e ativa) está aumentada, verificando-se que a sua localização é predominantemente citoplasmática nas amostras CDIS e nuclear no CDI; 7. A expressão da PKRp (forma fosforilada) apresenta localização predominantemente nuclear e citoplasmática nas amostras CDIS e CDI, respectivamente. Em resumo, o estudo sobre os miR-29b, miR-122, miR-886-3p e miR-886-5p em amostras FFPE confirmaram os resultados obtidos em cultura de células tumorais e sugerem que estes miRNAs estão envolvidos na progressão do carcinoma mamário. É importante salientar que a função da PKR nuclear é ainda desconhecida e o presente estudo constitui a primeira análise realizada sobre a localização intracelular da PKRt e PKRp durante a progressão tumoral. Os nossos resultados sugerem que a fosforilação da PKR induz a translocação nuclear desta proteína quinase. Assim, este trabalho poderá abrir novas perspectivas para a elucidação da função da PKR nuclear
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2013
- Data da defesa: 27.09.2013
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ABNT
GARCIA, Patrícia Rondinelli Darin. Expressão da PKR e de microRNAs envolvidos na regulação do PACT (ativador da PKR) em carcinomas mamárias ductais in situ e invasivo. 2013. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2013. . Acesso em: 24 abr. 2024. -
APA
Garcia, P. R. D. (2013). Expressão da PKR e de microRNAs envolvidos na regulação do PACT (ativador da PKR) em carcinomas mamárias ductais in situ e invasivo (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Garcia PRD. Expressão da PKR e de microRNAs envolvidos na regulação do PACT (ativador da PKR) em carcinomas mamárias ductais in situ e invasivo. 2013 ;[citado 2024 abr. 24 ] -
Vancouver
Garcia PRD. Expressão da PKR e de microRNAs envolvidos na regulação do PACT (ativador da PKR) em carcinomas mamárias ductais in situ e invasivo. 2013 ;[citado 2024 abr. 24 ]
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