Desenvolvimento de PCR multiplex para detecção e diferenciação de categorias de Escherichia coli diarreiogênicas emergentes na cidade de Manaus (2011)
- Authors:
- Autor USP: MARTINEZ, MARINA BAQUERIZO - FCF
- Unidade: FCF
- Subjects: ESCHERICHIA COLI; DIARREIA
- Language: Português
- Abstract: A diarréia aguda é uma das principais causas de morbidade e mortalidade de crianças no mundo, as Escherichia coli diarreiogênicas (DEC) são importantes agentes causadores da diarréia nos países em desenvolvimento. As E. coli que causam diarréia são classificadas em categorias patogênicas de acordo com fatores de virulência específicos, codificados por cromossomos, plasmídios e DNA de bacteriófagos. Esses fatores de virulência fornecem a cada categoria uma capacidade de causar síndrome clínica com características epidemiológicas e patológicas distintas. Informações sobre a epidemiologia da E. coli patogênica e sua associação com doenças diarréicas é limitado porque não há testes de diagnóstico rápidos e eficientes para a identificação dos sorogrupos de DEC. As DEC podem ser classificadas em seis categorias, de acordo com seu mecanismo de patogenicidade como: E. coli enteropatogênica (EPEC Típica e Atípica), enterotoxigênica (ETEC), enteroinvasora (EIEC) enteroagregativa (EAEC), enterohemorrágica ou produtora de shiga toxina (STEC/EHEC), e adesão difusa (DAEC). Neste estudo foram desenvolvidos dois sistemas de PCR multiplex para a detecção dos fatores de virulência e foram avaliados a prevalência destes genes em 93 amostras de crianças de 5 a 12 anos com diarréia, coletadas nos hospitais da cidade de Manaus. Para a investigação dos fatores de virulência, as amostras isoladas foram repicadas para tubos de ensaio contendo caldo BHI, totalizando 216 colônias de E. coli foram incubadas a 37°C por 24h e posteriormente foi realizada a extração do DNA (choque térmico e &beta-mercaptoetanol/clorofórmio)No PCR multiplex foram determinados as regiões específicas que permitem a detecção dos lócus de virulência para a identificação de EPEC (Típica e Atípica), ETEC, EIEC, EAEC, STEC e EHEC, os genes de virulência utilizados no primeiro sistema multiplex foram invE, bfpA, ent, EAF e stx2 e do segundo sistema: uidA, EAEC, bfpB, escV, stx1, estIb e ast1. Dentre as 216 amostras de E. coli genotipadas pelo PCR Multiplex apresentaram EPEC Típica 17%, EPEC Atípica 23%, EAEC 4%, EIEC 13% e EHEC/STEC 7%, ETEC 11% e E. coli não patogênica 24% no entanto 3% das amostras de E. coli não foram identificadas seu sorogrupo pelo PCR multiplex. Sendo que das 15 amostras positivas para EHEC/STEC, uma criança apresentou os genes stx1 e stx2 que podem vir a expressar as toxinas causadores da síndrome hemolítica-urémica (SHU), agravando o quadro em 25% dos casos e levando a óbito de 3 a 5%. Com isto este trabalho pode-se observar que é possível a aplicação dos protocolos multiplex para agilizar o diagnóstico molecular das categorias de DEC, suporte para as pesquisas sobre a epidemiologia da E. coli patogênicas e sua associação com doenças que acometem os institutos de saúde pública do país
- Imprenta:
- Publisher: Sociedade Brasileira de Microbiologia (SBM)
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2011
- Source:
- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Congresso Brasileiro de Microbiologia
-
ABNT
NOBRE, Carolinie et al. Desenvolvimento de PCR multiplex para detecção e diferenciação de categorias de Escherichia coli diarreiogênicas emergentes na cidade de Manaus. 2011, Anais.. São Paulo: Sociedade Brasileira de Microbiologia (SBM), 2011. . Acesso em: 28 mar. 2024. -
APA
Nobre, C., Taquita, P., Santos, I., Cavalcante, A., Martinez, M. B., & Orlandi, P. P. (2011). Desenvolvimento de PCR multiplex para detecção e diferenciação de categorias de Escherichia coli diarreiogênicas emergentes na cidade de Manaus. In Resumos. São Paulo: Sociedade Brasileira de Microbiologia (SBM). -
NLM
Nobre C, Taquita P, Santos I, Cavalcante A, Martinez MB, Orlandi PP. Desenvolvimento de PCR multiplex para detecção e diferenciação de categorias de Escherichia coli diarreiogênicas emergentes na cidade de Manaus. Resumos. 2011 ;[citado 2024 mar. 28 ] -
Vancouver
Nobre C, Taquita P, Santos I, Cavalcante A, Martinez MB, Orlandi PP. Desenvolvimento de PCR multiplex para detecção e diferenciação de categorias de Escherichia coli diarreiogênicas emergentes na cidade de Manaus. Resumos. 2011 ;[citado 2024 mar. 28 ] - Purificação e caracterização de pili e flagelo de Stenotrophomonas maltophilia
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