Expressão de hormônio de crescimento da carpa Hypophthalmichthys molitrix em leveduras (2011)
- Authors:
- Autor USP: MONTEIRO, ANA RAQUEL DE SOUZA - BIOTECNOLOGIA
- Unidade: BIOTECNOLOGIA
- Subjects: BIOTECNOLOGIA; CARPA; GENÉTICA MICROBIANA; SACCHAROMYCES; RECOMBINAÇÃO GENÉTICA; LEVEDURAS; PROTEÍNAS RECOMBINANTES
- Language: Português
- Abstract: Neste trabalho, construiu-se linhagens recombinantes de Pichia pastoris e Saccharomyces cerevisiae que expressam hormônio de crescimento de carpa (GHc). Para expressão de GHc em P. pastoris, o cDNA de GH de H. molitrix foi inserido nos plasmídeos pHILD2 (expressão interna) e pPIC9K (expressão e secreção) dando origem aos plasmídeos pHILGH e pPICGH. A expressão em S. cerevisiae foi controlada pelo promotor e terminador PGK e o cassete de expressão ladeado por elementos δ, dirigindo a integração em múltiplas cópias no genoma. Ainda, construiu-se um plasmídeo onde a sequência de GHc foi fusionada a uma sequência sinal modificada (sequência sinal de proteína de K. lactis, fusionada a fragmento de interleucina humana), visando altos níveis de secreção. Os transformantes (expressão interna) expressaram proteína recombinante de 20 KDa. Um dos transformantes de S. cerevisiae secreta cerca de 1045,0 µg/ml de GHc. As proteínas recombinantes apresentaram hibridação específica contra anticorpo anti GHc comercial indicando que são biologicamente ativas.
- Imprenta:
- Data da defesa: 30.06.2011
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ABNT
MONTEIRO, Ana Raquel de Souza. Expressão de hormônio de crescimento da carpa Hypophthalmichthys molitrix em leveduras. 2011. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2011. . Acesso em: 24 abr. 2024. -
APA
Monteiro, A. R. de S. (2011). Expressão de hormônio de crescimento da carpa Hypophthalmichthys molitrix em leveduras (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. -
NLM
Monteiro AR de S. Expressão de hormônio de crescimento da carpa Hypophthalmichthys molitrix em leveduras. 2011 ;[citado 2024 abr. 24 ] -
Vancouver
Monteiro AR de S. Expressão de hormônio de crescimento da carpa Hypophthalmichthys molitrix em leveduras. 2011 ;[citado 2024 abr. 24 ]
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