Expressão in vitro e in vivo da proteína PAMM, após indução de stress oxidativo (2010)
- Autor:
- Autor USP: SILVA, RAQUEL ASSED BEZERRA DA - FORP
- Unidade: FORP
- Sigla do Departamento: 807
- Subjects: PROTEÍNAS; ANTIOXIDANTES; CULTURA DE CÉLULAS; REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE; IMUNOHISTOQUÍMICA; WESTERN BLOTTING
- Language: Português
- Abstract: Recentemente foi identificado um novo membro da família Peroxiredoxina-2, denominado PAMM (Peroxiredoxin Activated in M-CSF stimulated Monocytes), a qual apresenta atividade antioxidante. Os objetivos do presente estudou foram: avaliar, in vibro, a expressão da PAMM, por meio de RT-PCR (Reverse Transcriptase-PCR), após a estimulação de células PBMCs (peripheral blood mononuclear cells) com peróxido de hidrogênio (‘H IND. 2’‘O IND. 2’); e caracterizar, in vivo, a participação da PAMM após a indução de stress oxidativo, em camundongos ovariectomizados, por meio da técnica de Western Blot, histoenzimologia (coloração TRAP), imunohistoquímica e da avaliação da razão GSH/GSSG. No estudo in nitro, PBMCs foram estimuladas, por 10 minutos com ‘H IND. 2’‘O IND. 2’ nas concentrações de 0, 10, 20 e 40µM. Decorridas 24 e 48 horas, a expressão do mRNA da proteína PAMM foi avaliada por meio de RT-PCR. No estudo in vivo, camundongos de 8 semanas de idade da linhagem Swiss-Webster foram divididos em 3 grupos: Grupo 1- ovariectomia+veículo; Grupo 2- ovariectomia+estrógeno; Grupo 3sham+veículo. A ovariectomia foi realizada objetivando a indução de stress oxidativo, o qual foi confirmado por meio da análise da densidade mineral óssea e peso uterino dos animais. Decorrido o período de 1 mês, os animais foram mortos e a região distal do fêmur esquerdo foi removida e masserada para a obtenção de ligados protéicos, os quais foram utilizados para a detecção da PAMM por meio da técnica de Western Blote para a determinação da razão GSH/GSSG. A região distal do fêmur direito também foi removida e submetida à análise imunohistoquimica para detecção da PAMM e coloração TRAP. Os resultados numéricos obtidas foram submetidos à análise estatística por meio da análise de variância 1-way ANOVA, seguido do teste t de Student, com nível de significância de 5%.Observou-se que em uma situação de stress oxidativo in nitro, ou seja, após estimulo de PBMCs com concentrações crescentes de peróxido de hidrogênio, ocorreu aumento da expressão do mRNA da PAMM, nos períodos de 24 e 48 horas pós-estimulo (p<0,05). Os resultados in vivo permitiram evidenciar que a ovariectomia em camundongos, ocasionou diminuição da densidade mineral óssea da região distal do fêmur e da razão GSH/GSSG (p<0,05), assim como aumento da quantidade de células TRAP-positivas, caracterizando o estabelecimento do stress oxidativo in vivo. Nesses casos, ocorreu diminuição da expressão da proteína PAMM. Por outro lado, os animais ovariectomizados e tratados com estrógeno apresentaram em todos os parâmetros analisados resultados semelhantes aos animais submetidos à cirurgia sham. Esses resultados evidenciaram que a proteína PAMM pode desempenhar atividade antioxidante in nitro e in vivo. Além disso, esse estudo descreve novos mecanismos relacionados ao status redox celular, inclusive no tecido ósseo, o que poderia tornar possível o desenvolvimento de novas estratégias para a prevenção e/ou tratamento de enfermidades ósseas em humanos por meio de moléculas-alvo, como a PAMM, que podem modular o status redox em células ósseas
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2010
- Data da defesa: 26.11.2010
-
ABNT
SILVA, Raquel Assed Bezerra da. Expressão in vitro e in vivo da proteína PAMM, após indução de stress oxidativo. 2010. Tese (Livre Docência) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2010. . Acesso em: 19 set. 2024. -
APA
Silva, R. A. B. da. (2010). Expressão in vitro e in vivo da proteína PAMM, após indução de stress oxidativo (Tese (Livre Docência). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Silva RAB da. Expressão in vitro e in vivo da proteína PAMM, após indução de stress oxidativo. 2010 ;[citado 2024 set. 19 ] -
Vancouver
Silva RAB da. Expressão in vitro e in vivo da proteína PAMM, após indução de stress oxidativo. 2010 ;[citado 2024 set. 19 ] - Associação entre experiência de cárie e índice de massa corpórea em crianças
- Agregado de trióxido mineral: estudo histopatológico e radiográfico após pulpotomia
- Intentional replantation of a mandibular molar: case report and 14-year follow-up
- Tratamento de cisto mandibular: Relato de caso
- Hidróxido de cálcio associado à clorexidina - estudo em cultura de células (RAW 264.7 e cultura primária de células da linhagem osteoblástica) e em tecido subcutâneo de camundongos. Avaliação da atividade antimicrobiana
- Efeito de diferentes formas de esterilização, com ou sem imersão prévia em solução à base de hidróxido de cálcio, sobre a endotoxina bacteriana (LPS) presente em limas endodônticas
- Congenital eruption cyst: a case report
- Inflammatory response after injection of mta to the peritoneal cavity of isogenic balb/c mice
- Restauração estética em um caso de hipoplasia de esmalte
- Derivado da matriz do esmalte: avaliação microscópica e radiográfica após pulpotomia
How to cite
A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas
