Avaliação da qualidade do DNA obtido de saliva humana armazenada e sua aplicabilidade na identificação forense em odontologia legal (2009)
- Authors:
- Autor USP: CARVALHO, SUZANA PAPILE MACIEL - FOB
- Unidade: FOB
- Sigla do Departamento: BAO
- Subjects: ODONTOLOGIA LEGAL; ODONTOLOGIA FORENSE; MEDICINA LEGAL; CRIMINOLOGIA; SALIVA; DNA; BIOLOGIA MOLECULAR
- Language: Português
- Abstract: A saliva pode ser utilizada como fonte eficiente de DNA para técnicas de identificação humana, as quais são aceitas como prova legal, sendo o parecer do profissional superlativo para a formulação da sentença. Esse material pode ser coletado de maneira indolor e não-invasiva e utilizado mesmo quando armazenado em diferentes condições. Este trabalho objetiva avaliar a qualidade do DNA obtido de saliva humana armazenada e sua aplicabilidade da identificação de pessoas. Foram analisadas amostras salivares de n=100 sujeitos da pesquisa, coletadas nas formas de saliva in natura e saliva coletada de swab. A saliva foi armazenada à -20ºC. Após 7 dias, realizou-se a primeira etapa, quando o DNA foi extraído das 200 amostras de saliva utilizando-se a resina InstaGene (Bio-Rad Laboratories, Inc., Hercules, CA, USA) e, posteriormente, submetido à PCR e à eletroforese. Após 180 dias de armazenamento da saliva, repetiu-se a mesma técnica da primeira fase, porém em apenas 20 amostras, selecionadas aleatoriamente do total de 100 amostras de saliva coletadas por swab bucal. Os resultados da primeira etapa indicaram que o DNA foi extraído com sucesso em 96% das reações realizadas para as 200 amostras de saliva, fato observado também quando se analisou as amostras em separado, de saliva in natura (94%) e saliva advinda do swab (98%). Além disso, não houve diferenças estatisticamente significantes na extração do DNA entre as duas formas de coleta de saliva utilizadas. Na segundafase, foi possível a detecção do gene alvo nas 20 amostras analisadas (100%). Posteriormente, objetivando-se aprofundar a análise do DNA salivar de maneira mais próxima ao padrão exigido em um processo de identificação, o gene SIX3-2 foi testado nas amostras e também foi feita a digestão do produto da PCR com a enzima de restrição MbO1 para avaliar polimorfismo do gene ADRA-2. Os resultados mostraram que a quantidade e a qualidade do DNA advindo de ) saliva do swab bucal, bem como as técnicas empregadas estão adequadas à análise forense do DNA. Portanto, a saliva humana é bastante útil como fonte de DNA e pode ser armazenada, em temperatura e condições ideais, para análise posterior
- Imprenta:
- Data da defesa: 17.03.2009
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ABNT
CARVALHO, Suzana Papile Maciel. Avaliação da qualidade do DNA obtido de saliva humana armazenada e sua aplicabilidade na identificação forense em odontologia legal. 2009. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Bauru, 2009. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25141/tde-02062009-105931/. Acesso em: 16 abr. 2024. -
APA
Carvalho, S. P. M. (2009). Avaliação da qualidade do DNA obtido de saliva humana armazenada e sua aplicabilidade na identificação forense em odontologia legal (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Bauru. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25141/tde-02062009-105931/ -
NLM
Carvalho SPM. Avaliação da qualidade do DNA obtido de saliva humana armazenada e sua aplicabilidade na identificação forense em odontologia legal [Internet]. 2009 ;[citado 2024 abr. 16 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25141/tde-02062009-105931/ -
Vancouver
Carvalho SPM. Avaliação da qualidade do DNA obtido de saliva humana armazenada e sua aplicabilidade na identificação forense em odontologia legal [Internet]. 2009 ;[citado 2024 abr. 16 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25141/tde-02062009-105931/
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