Trabalho de evento

Expressão regulada do gene COQ10 em mutantes de S. Cerevisiae com deficiência na síntese de COQ6 (2008)

• Authors:
  • Zampol, M. A.
  • Busso, C.
  • Barros, Mário Henrique de
• Autor USP: BARROS, MÁRIO HENRIQUE DE - ICB
• Unidade: ICB
• Assunto: MICROBIOLOGIA
• Language: Português
• Abstract: Objetivo: A coenzima Q6 (CoQ6) de S. cerevisiae, transportador eletrônico lipossolúvel, leva os elétrons dos complexos respiratórios I e II para o III. Sua função é afetada pelos genes COQ1-10, cujos mutantes não respiram, mas suas mitocôndrias são capazes de restabelecer a capacidade respiratória com adição de CoQ6. Diferente dos outros mutantes coq, coq10 apresenta níveis normais de CoQ6. A presença de um possível domínio StAR sugere que a Coq10p seja uma proteína de ligação a CoQ6. Assim, surgiu a possibilidade de estabelecer um protocolo de recuperação desses mutantes, otimizando a tomada de CoQ6 exógena, e sua conseqüente utilização na cadeia respiratória, através de diferentes níveis de expressão do gene COQ10. Métodos e Resultados: Transformação de leveduras W303 (parental), coq2 e coq10 com os pDNAs integrativos pCOQ10ST24 (GAL10+COQ10), pCOQ10ST38 (TEF1+COQ10) e pCOQ10ST39 (GPD1+COQ10), e de W303ST24 com pMA210+GAL4 para superativar GAL10. Construção de duplo mutantes coq2/coq3, coq2/coq4 e coq2/coq10 por cruzamentos entre as linhagens para comparação com coq2. Testes de crescimento em meio líquido não-fermentável (YPEG) suplementado com 15\mu M de CoQ6 exógena: ST38 e ST39 tiveram crescimento similar ao de não transformados, ST24 cresceu pouco e ST24GAL4 menos ainda; coq2/coq10 cresceu menos que todos os mutantes.) A quantificação dos níveis de Coq10p com western blot e antirabbit como anticorpo secundário mostrou que esses dependem da força dopromotor. A quantificação da atividade respiratória, com medidas de consumo de oxigênio e de redução de citocromo C aponta para uma melhora na resposta de ST38 e ST39. Conclusão: O crescimento de coq2/coq10 não foi resgatado como o dos outros mutantes, consistente com a hipótese de que Coq10p é transportadora de CoQ6. Entretanto, quanto maior a expressão de COQ10, pior a resposta à administração de CoQ6. As construções ST38 e ST39 parecem ser menos tóxicas, pois aumentam a capacidade respiratória.
• Imprenta:
  • Publisher: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP
  • Publisher place: São Paulo
  • Date published: 2008
• Source:
  • Título do periódico: Resumos
• Conference titles: Congresso do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo

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How to cite

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• ABNT

  ZAMPOL, M. A. e BUSSO, C. e BARROS, Mário Henrique de. Expressão regulada do gene COQ10 em mutantes de S. Cerevisiae com deficiência na síntese de COQ6. 2008, Anais.. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2008. . Acesso em: 18 abr. 2024.

• APA

  Zampol, M. A., Busso, C., & Barros, M. H. de. (2008). Expressão regulada do gene COQ10 em mutantes de S. Cerevisiae com deficiência na síntese de COQ6. In Resumos. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP.

• NLM

  Zampol MA, Busso C, Barros MH de. Expressão regulada do gene COQ10 em mutantes de S. Cerevisiae com deficiência na síntese de COQ6. Resumos. 2008 ;[citado 2024 abr. 18 ]

• Vancouver

  Zampol MA, Busso C, Barros MH de. Expressão regulada do gene COQ10 em mutantes de S. Cerevisiae com deficiência na síntese de COQ6. Resumos. 2008 ;[citado 2024 abr. 18 ]

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