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Expressão diferencial de genes em resposta a limitação de fosfato inorgânico no fungo filamentoso Neurospora crassa: análise funcional dos genes preg e nuc-1 (2008)

  • Autores:
  • Autor USP: LEAL, JULIANA - FMRP
  • Unidade: FMRP
  • Sigla do Departamento: RGE
  • Assuntos: EXPRESSÃO GÊNICA; FUNGOS; GENÉTICA
  • Idioma: Português
  • Resumo: O sistema de aquisição de fosfato inorgânico (Pi) em N. crassa é mediado por quatro genes regulatórios: nuc-2, preg, pgov e nuc-1. Quando o Pi é limitante, NUC-2 inibe a ação do complexo PREG-PGOV, permitindo o transporte do fator de transcrição NUC-1 para o núcleo e a expressão de fosfatases Pi-repressíveis. No presente estudo, foi investigado o perfil de expressão gênica das linhagens mutantes `preg POT.C` e `nuc-1 POT. RIP` cultivadas em Ph, alcalino e ácido, sob condições de limitação de PI. O objetivo desse trabalho foi contribuir para o entendimento da resposta adaptativa à limitação de Pi e identificar genes regulados pela ciclina PREG e pelo fator de transcrição NUC- 1. Utilizando as técnicas de Differentia/ Display (DDRT -PCR) e Hibridação Subtrativa Supressiva (SSH) foram isolados transcritos diferencialmente expressos nas linhagens mutantes `preg POT.C` e `nuc-1 POT. RIP` cultivadas em Pi-limitante, pH 7.8 e 5.4. Dentre os genes diferencialmente expressos na linhagem mutante `preg POT. C` que tiveram sua expressão validada por Northern Blot, estão transcritos similares a genes que codificam para ubiquinona C-metiltransferase, envolvida na biossíntese de coenzima Q; iso-orotato decarboxilase, implicada na via de reciclagem de pirimidinas (thymidine salvage pathway) , uma via alternativa a via de biossíntese de novo de pirimidinas; galactose-1-fosfato uridililtransferase, a qual atua convertendo galactose-1-fosfato e UDP-glicose em glicose-1-fosfato eUDP-galactose. Por outro lado, dentre os genes com expressão diferencial na linhagem mutante `nuc-1 POT. RIP`, os quais tiveram a expressão confirmada, estão aqueles que codificam para as seguintes proteínas: hexagonal-1, principal componente dos corpos de Woronin; proteína de choque térmico HSP70, a qual atua como chaperona numa variedade de processos celulares; proteína carreadora de ADP/ATP, responsável pela importação de ADP presente no citosol e exportação de A TP para fora da matriz mitocondrial; proteínas ribossomais L 16 e L30, envolvidas na biossíntese de ribossomos; proteína da via biosintética de tiamina NMT -1, implicada na biossíntese de tiamina; proteína bifuncional ARGJ, a qual participa da biossíntese de arginina; guanilato quinase, envolvida na via de reciclagem de purinas (guanine salvage pathway) , uma via alternativa a via de biossíntese f de novo de purinas. Além disso, genes como hsp-70 apresentaram expressão alterada na linhagem mutante `pacC POT. Ko` cultivada em pH ácido. Estes resultados revelam novas vias metabólicas envolvidas na resposta adaptativa à limitação de Pi e reforçam a existência de uma convergência entre o sistema de aquisição de Pi, o circuito regulador do pH e o metabolismo de nucleotídeos. Além disso, esses resultados indicam que o fator de transcrição PACC também tem funções metabólicas em pH ácido
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 09.10.2008

  • Como citar
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    • ABNT

      LEAL, Juliana. Expressão diferencial de genes em resposta a limitação de fosfato inorgânico no fungo filamentoso Neurospora crassa: análise funcional dos genes preg e nuc-1. 2008. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2008. . Acesso em: 19 set. 2024.
    • APA

      Leal, J. (2008). Expressão diferencial de genes em resposta a limitação de fosfato inorgânico no fungo filamentoso Neurospora crassa: análise funcional dos genes preg e nuc-1 (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.
    • NLM

      Leal J. Expressão diferencial de genes em resposta a limitação de fosfato inorgânico no fungo filamentoso Neurospora crassa: análise funcional dos genes preg e nuc-1. 2008 ;[citado 2024 set. 19 ]
    • Vancouver

      Leal J. Expressão diferencial de genes em resposta a limitação de fosfato inorgânico no fungo filamentoso Neurospora crassa: análise funcional dos genes preg e nuc-1. 2008 ;[citado 2024 set. 19 ]

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