Modulação de ERK3 e MAP2 por prolactina e glicocorticóides durante a maturação da resposta secretora de ilhotas de ratos (2008)
- Authors:
- Autor USP: SILVA, SILVANA AUXILIADORA BORDIN DA - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: FISIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Introdução: ERk3 é uma MAPk que regula as etapas distais da secreção de insulina induzida por glicose. O mecanismo envolvido depende de sua associação com MAP2, uma proteína reguladora da reorganização dos microtúbulos. A relevância funcional da ERk3 foi identificada pela análise do perfil transcricional de ilhotas pancreáticas tratadas com prolactina (PRL), um potente hormônio trófico para as células-beta. Sabe-se que a maturação da resposta secretora da célula-? ocorre durante a vida pós-natal; os altos níveis PRL e os glicocorticóides (GC) maternos, característicos do periparto, são provavelmente os principais responsáveis por este processo. Entretanto, até o momento não há evidências da participação de ERk3-MAP2 na maturação das ilhotas neonatais induzida por estes hormônios. Objetivos: Avaliar a expressão de ERk3 e MAP2 durante a maturação neonatal das ilhotas in vivo, e a participação da PRL e GC na regulação destas proteínas in vitro. Métodos: Foram utilizados pâncreas totais de ratos neonatos de 1, 2, 3, 8 e 21 dias de vida (P1, P2, P3, P8 e P21, respectivamente), ilhotas P1-P2 cultivadas por 5-7dias com PRL (500 ng/ml) e células de insulinoma de rato (RINm5F) cultivadas por 6h na presença e na ausência de PRL, seguidas por cultivo adicional de 18h com veículo, PRL, dexametasona (DEX, 100 nM) ou PRL+DEX. Os tecidos e as células foram submetidos à extração de proteínas e RNA totais. Os extratos protéicos foram usados para análise de ERk3 e MAP2 porwestern blotting e para imunoprecipitação da MAP2 e análise da associação com ERk3. O RNA total foi usado para análise da expressão de ERk3 e MAP2 por RT-PCR convencional. A distribuição de ERk3 e MAP2 no pâncreas total foi verificada por imuno-histoquímica. ) Resultados: O conteúdo de ERk3 aumentou durante a maturação pancreática, atingindo valores significativamente maiores que P1 em P3 e P8 (1,97 ± 0,09 vezes, N = 3, e 1,54 ± 0,11, N = 6, respectivamente; P < 0,05), e retornou aos valores de P1 em P21. MAP2 diminuiu em P2 (0,49 ± 0,10, N = 3; p < 0,05), e reduziu a 0,29 vezes de P1 entre P3 e P21 (N = 3; p < 0,001). A associação entre estas proteínas acompanhou a expressão de ERk3, isto é, aumentou em P3 e P8 (1,82 ± 0,15 e 1,83 ± 0,12 vezes versus P1 e P21, N = 7; p < 0,05). O conteúdo de ERk1/2 e sua associação com MAP2 não se alteraram ao longo da maturação. O tratamento com PRL aumentou a expressão de ERk3 em ilhotas e células cultivadas. Os valores relativos à expressão do gene do GAPDH foram 21 ± 4% para células RINm5F e 59 ± 8% para ilhotas (N = 4; p < 0,05), e do conteúdo protéico 1,6 ± 0,15 vezes nas células e 1,2±0,07 vezes nas ilhotas (N = 3; P < 0,05). O tratamento com DEX ou DEX+PRL também aumentou o conteúdo de ERk3 em 2,4 ± 0,2 e 1,9 ± 0,1 vezes, respectivamente (N = 4; p < 0,05). A expressão de MAP2 não foi alterada em nenhum tratamento. A análise imunohistoquímica mostrou que apenas a expressão de MAP2 é restrita às ilhotas. Conclusões: Oaumento da expressão de ERk3 e de sua associação com MAP2 coincide temporalmente com a maturação da resposta secretora do pâncreas endócrino. Esse processo parece ser regulado positivamente pelo aumento dos níveis de PRL e GC no período perinatal.
- Imprenta:
- Source:
- Título do periódico: Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia
- Volume/Número/Paginação/Ano: v. 52, suppl. 2, p. S162, res. 01.B.17, 2008
- Conference titles: Congresso Paulista de Diabetes e Metabolismo
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ABNT
YAMANAKA, T. S. et al. Modulação de ERK3 e MAP2 por prolactina e glicocorticóides durante a maturação da resposta secretora de ilhotas de ratos. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia. São Paulo: Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo. . Acesso em: 24 abr. 2024. , 2008 -
APA
Yamanaka, T. S., Lellis-Santos, C., Anhê, G. F., Bordin, S., & Rodrigues-Silva, C. (2008). Modulação de ERK3 e MAP2 por prolactina e glicocorticóides durante a maturação da resposta secretora de ilhotas de ratos. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia. São Paulo: Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo. -
NLM
Yamanaka TS, Lellis-Santos C, Anhê GF, Bordin S, Rodrigues-Silva C. Modulação de ERK3 e MAP2 por prolactina e glicocorticóides durante a maturação da resposta secretora de ilhotas de ratos. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia. 2008 ; 52 S162.[citado 2024 abr. 24 ] -
Vancouver
Yamanaka TS, Lellis-Santos C, Anhê GF, Bordin S, Rodrigues-Silva C. Modulação de ERK3 e MAP2 por prolactina e glicocorticóides durante a maturação da resposta secretora de ilhotas de ratos. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia. 2008 ; 52 S162.[citado 2024 abr. 24 ] - Tratamento ICV agudo com TNFa aumenta secreção de insulina e leva a alterações na expressão gênica em ilhotas
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