Estudo da adsorção de horseradish peroxidase (HRP) sobre superfícies planas e de sua atividade catalítica (2008)
- Authors:
- Autor USP: NAVES, ALLINY FERREIRA - IQ
- Unidade: IQ
- Sigla do Departamento: QFL
- Subjects: ADSORÇÃO (ESTUDO;PROCESSOS); ENZIMAS OXIRREDUTORAS (ATIVIDADE); PEROXIDASE; CATÁLISE (ATIVIDADE); FILMES FINOS; ATIVAÇÃO ENZIMÁTICA
- Language: Português
- Abstract: Este trabalho está dividido em duas partes: (i) estudo da adsorção da enzima horseradish peroxidase (HRP) sobre substratos planos (lâminas de Si/Si`O IND.2`, filmes ASP/Si/Si´O IND.2`, filmes CABads/Si/Si`O IND.2`, filmes CABspin/Si/Si`O IND.2´ e filmes CMCABspinlSi/Si`O IND.2´) seguida de testes da atividade enzimática da HRP imobilizada sobre estes substratos e (ii) obtenção de oligômeros divinílicos mediada pela HRP. Na primeira parte, a imobilização da. HRP sobre substratos planos foi estudada através de elipsometria, microscopia de força atômica (AFM) e medidas de ângulo de contato. As isotermas de adsorção da HRP sobre Si/Si´O IND.2´, APSlSi/Si`O IND.2´ e CABadsLSVSi´O IND.2` apresentaram um aumento contínuo da quantidade de material adsorvido ´GAMAIND.HRP´ em função da concentração da solução de enzima até atingir um patamar de adsorção no qual verificou-se a formação de uma monocamada de HRP adsorvida. Nestes casos, o processo de adsorção da HRP pode ser descrito pelo modelo de adsorção aleatória (RSA). Para filmes HRP/CABspinlSi/Si`O IND.2´ e HRP/CMCABspinlSi/Si´O IND.2´ observou-se adsorção cooperativa de moléculas de HRP e formação de multicamadas. A adsorção da HRP sobre Si/Si`O IND.2´, filmes APS, CABads e CMCABspin é um processo irreversível. Ao contrário, HRP adsorve reversivelmente sobre filmes CABspin, fato evidenciado pelo decréscimo de ´DA ORDEM DE 30 POR CENTO´ na espessura dos filmes de enzima. A atividade catalítica dos filmes de HRPimobilizados sobre substratos planos foi verificada na reação de oxidação do ABTS. Os testes de atividade catalítica mostraram que os substratos com a HRP adsorvida podem ser reutilizados 3 vezes sem dessorção ou perda da atividade catalítica da enzima, com exceção dos filmes HRP/CABspin/Si/Si´O IND.2´ que se tornam inativos após a primeira catálise. A condição de máxima atividade catalítica de HRP imobilizada foi correlacionada com grau de cobertura ) de ´DA ORDEM DE 55 POR CENTO´. o emprego do monômero etileno glicol dimetacrilato (EGDMA) em reações de polimerização catalisadas por filmes HRP/Si/Si`O IND.2´ ou pela HRP livre em solução à temperatura ambiente revelou a formação de partículas cristalinas com geometria poligonal. Com objetivo de compreender a formação das estruturas cristalinas, a segunda parte do trabalho focou a formação de oligômeros de EGDMA e trietileno glicol dimetacrilato (TEGDMA) em meio aquoso catalisada pela HRP na presença `H IND.2`´O IND.2´ a temperatura ambiente. Os oligômeros de EGDMA e/ou TEGDMA foram caracterizados por gravimetria, cromatografia de permeação em gel, espectroscopia vibracional na região do infravermelho e espectroscopia `ANTPOT.1H` RMN. A auto-associação dos oligômeros originou partículas cristalinas com ângulos retos, como evidenciado pelas imagens de microscopia eletrônica de varredura. As medidas de calorimetria exploratória diferencial e difração de raio-x confirmaram a cristalinidade das amostras. Osoligômeros de EGDMA, TEGDMA e EGDMA-co-TEGDMA sintetizados na presença do sistema HRP-`H IND.2´`O IND.2´ apresentaram grupos vinila pendentes, boa solubilidade em clorofórmio e ponto de fusão bem definido, evidenciando pouca reticulação ou ciclização e mostrando que as propriedades catalíticas da HRP propiciam um ambiente reacional apropriado para produzir materiais poliméricos com novas características
- Imprenta:
- Data da defesa: 10.07.2008
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ABNT
NAVES, Alliny Ferreira. Estudo da adsorção de horseradish peroxidase (HRP) sobre superfícies planas e de sua atividade catalítica. 2008. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2008. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46132/tde-24072008-133854/. Acesso em: 23 abr. 2024. -
APA
Naves, A. F. (2008). Estudo da adsorção de horseradish peroxidase (HRP) sobre superfícies planas e de sua atividade catalítica (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46132/tde-24072008-133854/ -
NLM
Naves AF. Estudo da adsorção de horseradish peroxidase (HRP) sobre superfícies planas e de sua atividade catalítica [Internet]. 2008 ;[citado 2024 abr. 23 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46132/tde-24072008-133854/ -
Vancouver
Naves AF. Estudo da adsorção de horseradish peroxidase (HRP) sobre superfícies planas e de sua atividade catalítica [Internet]. 2008 ;[citado 2024 abr. 23 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46132/tde-24072008-133854/
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