Detecção da mutação BRAF POT. V600E em carcinoma papilífero de tireóide em material emblocado em parafina (2008)
- Authors:
- Autor USP: KIMURA, EDNA TERUKO - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: HISTOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: A mutação de BRAF é a alteração genética mais freqüente do carcinoma de tireóide e observada quase que exclusivamente no carcinoma papilífero (CP). A mutação oncogênica de BRAF está localizada na posição 1799, no éxon 15, envolvendo a troca de uma base timina por uma adenina (T1799A), que produz uma proteína com a substituição da valina por ácido glutâmico no aminoácido 600 da proteína BRAF (BRAF POT. V600E), promovendo uma ativação sustentada da via de sinalização MAPK. A presença de mutação BRAF tem sido associada aos carcinomas papilíferos de comportamento mais agressivo e de pior prognóstico clínico (1,2). Desde que foi descrita há cerca de 5 anos (1), a incidência de mutação no carcinoma papilífero vem sendo avaliada em várias regiões do mundo (1,2). Este estudo visa analisar a mutação BRAF POT. T1799A em tecido tumoral conservado em parafina, observando a freqüência da mutação em CPT de pacientes brasileiros, assim como oferecer uma informação adicional que possa ser útil no segmento clínico do paciente. Material e Método: Neste estudo incluímos o material anatomopatológico de 147 pacientes com diagnóstico de carcinoma papilífero de tireóide, submetidos à cirurgia na cidade de São Paulo, no período entre 2003 e 2007. Cortes histológicos de cerca de 10 µm foram desparafinizados e o DNA extraído utilizando solução de lise celular contendo NaCl (5M) e proteinase K (20 mg/ml). A amplificação do segmento do DNA da região do nucleotídeo 1.599 do gene BRAF foi realizadapor PCR utilizando primers específicos e a presença de banda única no produto gerado (231pb) foi conferido em gel de agarose 1%; 5 µL do amplificado foi desnaturado com NaOH 10 mM a 95° C e aplicado em gel de poliacrilamida MDE 0,6% e a migração das bandas (single strand conformation polymorphisms, SSCP) analisada após a coloração com nitrato de prata, baseadas em amostras controle normal (linhagem PTC) e de mutação (linhagem NPA e ARO). Resultado: As amostras de DNA com mutação BRAF apresentam um padrão de eletroforese que mostra uma banda adicional na migração no gel. Este padrão de migração foi pareado à análise de seqüenciamento das amostras controles e de parte dos tecidos deste estudo. Dos 147 pacientes analisados, detectamos mutação BRAF T1799A em 60 (40,8%). Conclusão: Neste estudo observamos que 40% dos carcinomas papilíferos de tireóide da população brasileira apresenta BRAF POT. V600E, incidência semelhante à de outros países. A análise da mutação BRAF a partir de material emblocado em parafina pelo método de SSCP é eficiente para detectar BRAF POT. T1799A e pode ser útil no seguimento clínico do paciente, pois esta mutação é um importante indicador molecular de agressividade e até mesmo progressão para padrões histológicos indiferenciados de carcinoma de tireóide
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- Título do periódico: Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia
- Volume/Número/Paginação/Ano: v. 52, suplemento 3, 2008
- Conference titles: Encontro Brasileiro de Tiróide
-
ABNT
DA SILVA, M. J. et al. Detecção da mutação BRAF POT. V600E em carcinoma papilífero de tireóide em material emblocado em parafina. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia. Campinas: Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo. . Acesso em: 23 abr. 2024. , 2008 -
APA
Da Silva, M. J., Fuziwara, C. S., Gasque, K. C. S., Geraldo, M. V., Blanco, G., Raimundo, S. G., et al. (2008). Detecção da mutação BRAF POT. V600E em carcinoma papilífero de tireóide em material emblocado em parafina. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia. Campinas: Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo. -
NLM
Da Silva MJ, Fuziwara CS, Gasque KCS, Geraldo MV, Blanco G, Raimundo SG, Kulcsar MAV, Friguglietti CUM, Waitzberg AFL, Kimura ET. Detecção da mutação BRAF POT. V600E em carcinoma papilífero de tireóide em material emblocado em parafina. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia. 2008 ; 52[citado 2024 abr. 23 ] -
Vancouver
Da Silva MJ, Fuziwara CS, Gasque KCS, Geraldo MV, Blanco G, Raimundo SG, Kulcsar MAV, Friguglietti CUM, Waitzberg AFL, Kimura ET. Detecção da mutação BRAF POT. V600E em carcinoma papilífero de tireóide em material emblocado em parafina. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia. 2008 ; 52[citado 2024 abr. 23 ] - Mutação de BRAF em câncer de tiróide
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