Microscopia de fluorescência na análise quantitativa de micronúcleos (2002)
- Authors:
- Autor USP: SANTELLI, GLAUCIA MARIA MACHADO - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: HISTOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Micronúcleos são pequenos corpos extranucleares formados durante a mitose. São constituídos por cromossomos inteiros ou fragmentados, envolvidos pelo envelope nuclear. A freqüência dessas estruturas têm sido utilizada como parâmetro para avaliar o potencial genotóxico de inúmeras substâncias em diferentes tipos celulares. Em células em cultura, a maneira convencional de analisar micronúcleos quantitativamente é através de reação de Feulgen e análise em microscopia de luz. Porém, o uso de corantes fluorescentes parece apresentar maior sensibilidade na detecção de micronúcleos. Assim, este trabalho objetiva validar o uso de microscopia de fluorescência na análise de indução de micronúcleos. O trabalho foi desenvolvido utilizando-se a linhagem de células HK2, provenientes de carcinoma de pulmão humano. As células foram mantidas em cultura em meio mínimo de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM), suplementado com 10% de soro fetal bovino, sob atmosfera de 5% de CO2, a 37ºC. Durante a fase exponencial de crescimento, as células foram submetidas ao tratamento com afidicolina (0,1µg/mL), uma droga que afeta o ciclo celular. Após 72 horas de tratamento, as células foram fixadas em formaldeído (3,7%) ou etanol-ácido acético (3:1). Os núcleos foram corados com Iodeto de Propídio e SYTOX®green separadamente e analisados em microscopia de fluorescência. O material também submetido à reação de Feulgen para análise em microscopia de luz.Os resultados obtidos mostraram que há diferençaentre as duas técnicas utilizadas. Dentre 2000 células analisadas em microscopia de luz, 5% eram micronucleadas. Esse número atingiu 8,5% quando a mesma quantidade de células foi analisada por fluorescência
- Imprenta:
- Publisher: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2002
- Source:
- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Congresso Instituto Ciências Biomédicas, IV
-
ABNT
DIAS, V M e MANELLI-OLIVEIRA, R e MACHADO-SANTELLI, Gláucia Maria. Microscopia de fluorescência na análise quantitativa de micronúcleos. 2002, Anais.. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2002. . Acesso em: 20 abr. 2024. -
APA
Dias, V. M., Manelli-Oliveira, R., & Machado-Santelli, G. M. (2002). Microscopia de fluorescência na análise quantitativa de micronúcleos. In Resumos. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP. -
NLM
Dias VM, Manelli-Oliveira R, Machado-Santelli GM. Microscopia de fluorescência na análise quantitativa de micronúcleos. Resumos. 2002 ;[citado 2024 abr. 20 ] -
Vancouver
Dias VM, Manelli-Oliveira R, Machado-Santelli GM. Microscopia de fluorescência na análise quantitativa de micronúcleos. Resumos. 2002 ;[citado 2024 abr. 20 ] - Cytoskeleton and nuclear DNA content in pleomorphic cell cultures
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