Discriminação de espécies de Leishmania por meio de PCR específico com oligonucleotídeos baseados em SSU rDNA (2001)
- Autores:
- Autor USP: WINTER, LUCILE MARIA FLOETER - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: PARASITOLOGIA
- Idioma: Português
- Resumo: OBJETIVOS:A técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) tem mostrado elevada sensibilidade para o diagnóstico de Leishmanioses (Euk. Microbiol., 41(4), 324-330, 1994). O objetivo do trabalho consiste na identificação das espécies L. amazonensis e L. mexicana, através da técnica de PCR com oligonucleotídeos específicos desenhados a partir da seqüência do SSU rDNA. MÉTODOS E RESULTADOS: As reações de PCR foram feitas utilizando-se como DNA molde 20 ng de DNA genômico (Exp. Parasitol; 72:157-163, 1991) de cepas referência de L. amazonensis (MHOM/BR/73/M2269), L. mexicana (MNYC/BZ/62/M379), L. braziliensis (MHOM/BR/75/M2903) e L. chagasi (MHOM/BR/74/M2682). Os oligonucleotídeos S4 (5'GATCCAGCTGCAGGTTCACC3'), 5'S8 (5'ATTCA GAATTGCCCATAGAA3') e 5'S9 (5'GAATTC AGAATTGCCCATAGGA3') foram utilizados aos pares (S4 e 5'S8) e (S4 e 5'S9) na padronização do método. O par S4 e 5'S8 mostrou-se específico para L. amazonensis na reação feita a 94ºC, 1 minuto, 65ºC, 30 segundos, 72ºC, 30 segundos, gerando um produto de aproximadamente 500 pb. O par S4 e 5'S9 mostrou-se específico para L. mexicana na reação feita a 94ºC, 1 minuto, 67ºC, 30 segundos, 72ºC, 30 segundos, gerando um produto de aproximadamente 500 pb. CONCLUSÕES: Os oligonucleotídeos mostraram-se específicos, produzindo bandas únicas para as espécies estudadas, indicando que o método pode ser usado na discriminação das espécies L. amazonensis e L. mexicana
- Imprenta:
- Editora: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP
- Local: São Paulo
- Data de publicação: 2001
- Fonte:
- Título do periódico: Resumos
- Nome do evento: Congresso do Instituto de Ciências Biomédicas
-
ABNT
ZAMPIERI, R A e STEMPLIUK, V A e FLOETER-WINTER, Lucile Maria. Discriminação de espécies de Leishmania por meio de PCR específico com oligonucleotídeos baseados em SSU rDNA. 2001, Anais.. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2001. . Acesso em: 19 abr. 2024. -
APA
Zampieri, R. A., Stempliuk, V. A., & Floeter-Winter, L. M. (2001). Discriminação de espécies de Leishmania por meio de PCR específico com oligonucleotídeos baseados em SSU rDNA. In Resumos. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP. -
NLM
Zampieri RA, Stempliuk VA, Floeter-Winter LM. Discriminação de espécies de Leishmania por meio de PCR específico com oligonucleotídeos baseados em SSU rDNA. Resumos. 2001 ;[citado 2024 abr. 19 ] -
Vancouver
Zampieri RA, Stempliuk VA, Floeter-Winter LM. Discriminação de espécies de Leishmania por meio de PCR específico com oligonucleotídeos baseados em SSU rDNA. Resumos. 2001 ;[citado 2024 abr. 19 ] - Initial survey on the use of animals in scientific research and teaching reveals divided opinion of the Brazilian population
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