Paracoccina: Lectina de Paracoccidioides brasiliensis, ligante de de N-acetil-glicosamina interage com componente de matrix extracelular (2000)
- Autores:
- Autor USP: CARDOSO, MARGARETH LEITÃO GENNARI - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RPM
- Assunto: IMUNOLOGIA MÉDICA
- Idioma: Português
- Resumo: Jacalin Binding Exoantigen (JBE), uma fração antigênica de levedura de Paracoccidioides brasiliensis foi isolado e caracterizado por sua habilidade de se ligar à jacalina imobilizada. Estudo cinético mostrou que o máximo de JBE liberado emcultura de meio líquido ocorre aos 21 dias, quando essa fração corresponde a 1,67% das proteínas fúngicas secretadas. A fração ligante, eluída com D-galactose 0,4M, quando analisada por SDS-PAGE a corada pela prata originou uma banda de 190kDa,freqüentemente associada com componentes de 70 e 55 kDa. Essas duas bandas adicionais foram mais proeminentes sob condições redutoras. Os três componentes foram reconhecidos por anticorpos de coelho gerados por imunização com a banda de 190kDaexcisada de géis de SDS-PAGE. Nenhum outro componente de preparação bruta de exoantígeno foi reconhecido pelos anticorpos antibanda de 190 kDa. Para verificar a homologia estrutural entre os três componentes, tentamos, sem sucesso, determinarasequência N-terminal. A digestão tríptica das bandas nos géis deram eluições com perfis similares em RP-HPLC. Um pico proeminente obtido da banda de 55 kDa apresentou uma sequencia GTETPYFR., que não apresentou homologia com nenhumaproteínadepositada em banco de dados. Determinou-se também a afinidade da preparação JBE a açúcar da preparação JBE. Incubação de amostras JBE por duas horas à temperatura ambiente com esferas de açúcar, seguida de lavagem, tratamento com tampãodeamostra a análise por SDSPAGE indicaramque JBE apresentava a seguinte ordem de afinidade aos açúcares: N-acetil-D-glicosamina > Dglicose > D-manose > melibiose. Não houve ligação à galactose-agarose ou esferas de agarose não modificada.Essesdados, foram considerados sugestivos de que a fração JBE contivesse um componente lectínico, com afinidade para N-acetil-glicosamina. Tal especificidade resultou na purificação da lectina de P. brasiliensis através de cromatografia deafinidade ) em coluna de Agarose-N-acetil -glicosamina que passou a ser denominada Paracoccina. Paracoccina corresponde essencialmente ao componente de 70 kDa da fração JBE. Os anticorpos policlonais específicos gerados contra a bandade 190 kDareconhecem, na levedura de P. brasiliensis, antígenos de superficie, predominantemente localizados na região de brotamento. JBE foi capaz de se ligar a laminina , glicoproteína da matriz extracelular, mas não à fibronectina outrombospondina. Aligação à laminina éinibida por N-acetil-glicosamina e manose. JBE induz a liberação de NO por macrófagos murinos da linhagem J774, de maneira dose-dependente. A fração JBE parece ser um componente importante na patogenia de P.brasiliensis porapresentar capacidade de ligar-se à laminina a induzir a liberação de NO por macrófagos murinos
- Imprenta:
- Local: Ribeirão Preto
- Data de publicação: 2000
- Data da defesa: 01.06.2000
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ABNT
CARDOSO, Margareth Leitão Gennari. Paracoccina: Lectina de Paracoccidioides brasiliensis, ligante de de N-acetil-glicosamina interage com componente de matrix extracelular. 2000. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2000. . Acesso em: 19 abr. 2024. -
APA
Cardoso, M. L. G. (2000). Paracoccina: Lectina de Paracoccidioides brasiliensis, ligante de de N-acetil-glicosamina interage com componente de matrix extracelular (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Cardoso MLG. Paracoccina: Lectina de Paracoccidioides brasiliensis, ligante de de N-acetil-glicosamina interage com componente de matrix extracelular. 2000 ;[citado 2024 abr. 19 ] -
Vancouver
Cardoso MLG. Paracoccina: Lectina de Paracoccidioides brasiliensis, ligante de de N-acetil-glicosamina interage com componente de matrix extracelular. 2000 ;[citado 2024 abr. 19 ]
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