Ativação das caspases -2, -3, -8 e -9 durante a apoptose de células wehi-164 estimuladas com TNFalfa: correlações com a perda do potencial de membrana mitocondrial (2000)
- Autores:
- Autor USP: BELIZARIO, JOSE ERNESTO - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: IMUNOLOGIA
- Idioma: Português
- Resumo: Objetivo: A exposição de células do fibrosarcoma de roedores WEHI-164 ao TNF induz os eventos típicos da morte celular por apoptose, incluindo a clivagem do DNA genômico, a condensação e fragmentação da cromatina e ativação de ensimas caspases. O objetivo deste estudo foi analisar a ordem de ativação das enzimas caspases 2, 3, 8 e 9 e suas correlações com queda no potencial da membrana mitocondrial, bem como, com as alterações na expressão celular e o início e progressão da apoptose.Métodos e Resultados: A análise do conteúdo de DNA e distribuição de células nas fases do ciclo celular, por citometria de fluxo, mostrou que uma parte da população de células estimuladas com TNF 0.5 ng/ml sofre um bloqueio na fase G1, enquanto que as células em S continuam no ciclo celular. Nesta dose, a apoptose é induzida a partir de 4 horas de incubação. Na dose de 100 ng/ml ocorre um rápido aumento no número de células apoptóticas e a extrusão do fosfolipídeo fosfatidilserina para porção externa da membrana plasmática, como determinado pelo método da Anexina V-FITC.) Em ambos os casos a morte celular pode ser inibida em presença do peptídeo inibidor de caspases de amplo espectro, Z-VAD-fmk, pelo inibidor de caspase-3, DVED-fmk (parcial) e pelo inibidor de caspase-8, IETD-fmk. Utilizando substratos fluorogênicos específicos, mostramos que TNF, na dose 0.5 ng/ml, induz um aumento seqüencial na atividade proteolítica das caspases 8, 2 e 3, enquanto, na dose 100 ng/ml, além de um aumentoexpressivo da atividade destas três caspases, notamos também a ativação de caspase- 9. A análise de variações no potencial de membrana mitocondrial pelo método do DIOC6 mostrou que existe uma correlação direta entre o índice de apoptose e a perda da capacidade de retenção deste fluoróforo dentro da mitocondrias.Conclusões: A ativação diferencial de caspase-9 em células incubadas com TNF 100 ng/ml parece estar associada a eventos metabólicos e ultra-estruturais na mitocôndria, que estão sendo investigados em mais detalhes
- Imprenta:
- Fonte:
- Título do periódico: Resumos
- Nome do evento: Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental
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ABNT
ENNS, S C e AMARANTE-MENDES, João Gustavo Pessini e BELIZÁRIO, José Ernesto. Ativação das caspases -2, -3, -8 e -9 durante a apoptose de células wehi-164 estimuladas com TNFalfa: correlações com a perda do potencial de membrana mitocondrial. 2000, Anais.. São Paulo: FESBE, 2000. . Acesso em: 24 abr. 2024. -
APA
Enns, S. C., Amarante-Mendes, J. G. P., & Belizário, J. E. (2000). Ativação das caspases -2, -3, -8 e -9 durante a apoptose de células wehi-164 estimuladas com TNFalfa: correlações com a perda do potencial de membrana mitocondrial. In Resumos. São Paulo: FESBE. -
NLM
Enns SC, Amarante-Mendes JGP, Belizário JE. Ativação das caspases -2, -3, -8 e -9 durante a apoptose de células wehi-164 estimuladas com TNFalfa: correlações com a perda do potencial de membrana mitocondrial. Resumos. 2000 ;[citado 2024 abr. 24 ] -
Vancouver
Enns SC, Amarante-Mendes JGP, Belizário JE. Ativação das caspases -2, -3, -8 e -9 durante a apoptose de células wehi-164 estimuladas com TNFalfa: correlações com a perda do potencial de membrana mitocondrial. Resumos. 2000 ;[citado 2024 abr. 24 ] - Análise da expressão do gene humano PIF/DCD em camundongos transgênicos
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