Receptor e mecanismo de ação de melatonina em células S91 de melanoma murino de Cloudman (2000)
- Authors:
- Autor USP: ALMEIDA, ANA LUISA KADEKARO MARTINS DE - IB
- Unidade: IB
- Sigla do Departamento: BIF
- Assunto: MELANOMA
- Language: Português
- Abstract: Melatonina, o hormônio da glândula pineal, induz a agregação dos grânulos de pigmento em vertebrados hetegerotérmicos, em decorrência da interação do hormônio a um receptor de membrana acoplado à proteína Gi, resultando em rápida mudança de cor.Mamíferos não apresentam esse fenômeno e a cor do pelo ou da pele depende basicamente da síntese de pigmentos no interior de células especializadas denomindas melanócitos. Vários estudos procuraram relacionar a glândula pineal e o crescimento dediferentes tumores induzidos experimentalmente, inclusive o melanoma em mamíferos. Nós demonstramos previamente que melatonina induziu inibição da proliferação, bem como aumento de melanogênese em céluas S91 de melanoma murino. O objetivo destetrabalho foi demonstrar a presença de receptores de melatonina e determinar a(s) via(s) de trasdução do sinal desencadeado pela interação hormônio-receptor. No intuito de responder estas questões utilizamos células S91, células de melanomamurino B16 e a linhagem Melan-a de melanócitos murinos imortalizados em cultura. O tratamento de clone de células S91 pigmentadas induz redução da proliferação celular bem como aumento de atividade tirosinásica como havia sido anteriormenteobservado. O aumento da atividade tirosinásica foi acompanhado de um aumento de expressão das enzimas tirosinase e TRP-1. Além disso, melatonina induziu a fosforilação de proteínas de 34 e 43 kDa, igualmente fosforiladas por 'alfa'-MSH,conhecido hormôniomelanogênico. Os efeitos sobre a proliferação celular e melanogênese foram totalmente abolidos pelo tratamento com toxina de perfussis (50 ng/ml), sugerindo o envolvimento de uma proteína Gi/Go sensível à toxina de pertussis.Prazosin, um bloqueador seletivo de receptores de melatonina de baixa afinidade, deslocou ['ANTPOT.125 I']-iodomelatonina de maneira similar ao hormônio não-marcado em ensaios de ligação-competição realizados em células S91. Além disso, ) aboliu os efeitos de melatonina em experimentos de atividade biológica. O mecanismo de ação hormonal não envolve a mobilização dos estoques intracelulares de cálcio como demonstrado em células carregadas com marcadores deste íon. Aatividade biológica de melatonina não foi observada em células S91 espontaneamente selecionadas, B16 e Melan-a. Por outro lado, melatonina estimulou a atividade das enzimas catalase e glutationa peroxidase em células S91 selecionadas,demonstrando que este efeito ocorre mesmo na ausência de receptores. A metodologia de RT-PCR seguido de PCR nessas linhagens não-responsivas à melatonina demonstrou que o RNAm do receptor mt-1a de melatonina não estava expresso. Entretanto, emcélulas S91 transfectadas de maneira estável com este receptor, melatonina induziu os mesmos efeitos previamente observados. Demonstramos, portanto, que o receptor mt-1a quando expresso em células S91 acopla-se provavelmente aos mesmos elementosda via dos receptores expressos de forma nativa, induzindo o seu efeito atravésde uma proteína Gi/Go sensível à toxina de pertussis e que envolve uma redução dos níveis de AMPc celular
- Imprenta:
- Data da defesa: 21.06.2000
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ABNT
KADEKARO, Ana Luísa. Receptor e mecanismo de ação de melatonina em células S91 de melanoma murino de Cloudman. 2000. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2000. . Acesso em: 19 set. 2024. -
APA
Kadekaro, A. L. (2000). Receptor e mecanismo de ação de melatonina em células S91 de melanoma murino de Cloudman (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. -
NLM
Kadekaro AL. Receptor e mecanismo de ação de melatonina em células S91 de melanoma murino de Cloudman. 2000 ;[citado 2024 set. 19 ] -
Vancouver
Kadekaro AL. Receptor e mecanismo de ação de melatonina em células S91 de melanoma murino de Cloudman. 2000 ;[citado 2024 set. 19 ] - Efeitos in vivo e in vitro de melatonina sobre o crescimento tumoral, proliferacao celular e melanogenese em melanoma s-91 de cloudman
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